Seminiferous Tubules Wall Contraction with endothelin-1

LOSINNO A D; SORRIVAS V ; LOPEZ.L.A ; MORALES, A

Maipú - Mendoza

Otro; XXXI Reunion Científica Anual Sociedad De Biología de Cuyo.; 2013

Universidad Nacional de Cuyo

CONTRACCIÓN DE LA PARED DEL TUBULO SEMINÍFERO CON ENDOTELINA-1 Losinno AD 1, Sorrivas V 2, López LA 1, Morales A 1. 1. Instituto de Histología y Embriología (IHEM). 2. Servicio de Microscopía Electrónica, CCT- Bahía Blanca. amorales@fcm.uncu.edu.ar El testículo de los mamíferos contiene túbulos seminíferos (TS) responsables de la producción de espermatozoides. En los roedores adultos, los TS están rodeados por una monocapa de células mioides peritubulares (células MP) de morfología poligonal aplanada, que a su vez está cubierta exteriormente por una monocapa de células endoteliales linfáticas (CE) [1, 2]. Ambas monocapas constituyen la pared del TS. Las MP son células de músculo liso, con filamentos de actina y miosina organizados en dos capas independientes. Tripiciano y col (1997) describieron que estas células se contraen en presencia de endotelina-1 (ET1), un péptido sintetizado por las células de Sertoli y las CE. La actividad contráctil de las células MP está involucrada en el transporte de los espermatozoides y del fluido testicular a lo largo del TS [3]. Sin embargo, todavía no se conoce cómo esto afecta al resto del TS. El objetivo de este trabajo consiste en describir los cambios morfológicos de la pared del TS durante la contracción con ET-1 mediante el uso de los microscopios confocal y electrónicos de transmisión (MET) y barrido (MEB). Cuando analizamos por microscopía confocal a las células MP luego del tratamiento con ET-1, distinguimos que el contorno celular era más redondeado que el del control y que el área tangencial se reducía un 40%. Durante la contracción, las células mantuvieron la organización de los miofilamentos en dos capas independientes. En cada célula MP los filamentos de las capas interna y externa formaron bandas muy compactas que se correspondían con las de las células MP vecinas (Fig 1). Cuando observamos con MET los TS tratados con ET-1, las células MP contraídas, tenían mayor grado de entrecruzamiento de los miofilamentos y éstos, más cantidad de anclajes a la membrana plasmática. El núcleo mostró múltiples pliegues. Tanto la membrana basal del epitelio como la del endotelio aparecieron más gruesas y con ondulaciones (Fig 2). Para examinar la superficie de las células MP por MEB, debimos digerir previamente la capa de CE con colagenasa. En los TS relajados notamos zonas cubiertas por parches de CE que no alcanzaron a desprenderse y zonas libres de endotelio, donde las células MP mostraron una superficie lisa, con la morfología poligonal típica. En los segmentos contraídos con ET-1, la superficie de las células MP presentó pliegues a lo largo del eje tubular sobre zonas abultadas correspondientes a los núcleos, interrumpidos por pliegues menores que corrían perpendiculares al eje. Por otro lado, para estudiar la superficie de las CE utilizamos TS sin digestión con colagenasa. Por MEB, en los TS relajados observamos la superficie lisa de las CE, poligonales y planas, superpuesta a las células MP. Las CE mostraron un reborde de las uniones intercelulares en su periferia y por ser células muy delgadas, también pudimos descubrir los límites de algunas células MP por debajo de ellas. En cambio, en los segmentos no digeridos con colagenasa y contraídos con ET-1 las CE presentaron en su superficie múltiples proyecciones digitiformes pequeñas (Fig 3). Fig 1. Microscopía confocal de las células MP Fig 2. Microscopía Electrónica de Transmisión de las células MP Fig 3. Microscopía Electrónica de Barrido de las células MP 1. Palombi F, Salanova M, Tarone G, Farini D, Stefanini M. Distribution of beta 1 integrin subunit in rat seminiferous epithelium. Biol Reprod 1992; 47:1173-1182. 2. Vogl AW, Soucy LJ, Lew GJ. Distribution of actin in isolated seminiferous epithelia and denuded tubule walls of the rat. Anat Rec 1985; 213:63-71. 3. Tripiciano A, Palombi F, Ziparo E, Filippini A. Dual control of seminiferous tubule contractility mediated by ETA and ETB endothelin receptor subtypes. FASEB J 1997; 11:276-286. Control ET-1 Control ET-1