Efectos del sinergista trifenilfosfato sobre las carboxilesterasas y colinesterasas del anfípodo de agua dulce Hyalella curvispina

ANGUIANO O.L; PRIETO N.; VENTURINO A; MONTAGNA M

Mar del Plata

Congreso; 70. II Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental; 2008

SETAC

Las enzimas carboxilesterasas (CarbE) son una clase de serina-hidrolasas no especificas que catalizan eficientemente la hidrólisis de enlaces ésteres y amidas en una amplia variedad de sustancias. Estas enzimas cumplen un rol importante en el metabolismo y la detoxificación de muchos xenobióticos, incluidos plaguicidas, tanto como de sustancias endógenas. El pretratamiento con inhibidores de las CarbE, usados en concentraciones que inhiben a estas enzimas pero no a la acetilcolinesterasa, sinergiza la toxicidad de los anticolinesterásicos. El compuesto trifenil fosfato (TPP) es un conocido inhibidor de estas enzimas. Estudios previos en nuestro laboratorio determinaron una diferencia altamente significativa en la toxicidad del insecticida carbaril, asociada a la actividad incrementada de las CarbE de anfípodos de agua dulce (Hyalella curvispina) provenientes de una zona sujeta a la aplicación masiva de plaguicidas anticolinesterasicos, (canal de riego Fernández Oro), con anfípodos colectadas en una zona prístina (lago Los Barreales). El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del TPP sobre las enzimas CarbE y colinesterasa (ChE) de anfípodos H. curvispina. Las ejemplares fueron colectados en Fernández Oro y lago las Barreales y aclimatados alas condiciones de laboratorio. Se midieron las actividades de ChE y CarbE en al menos cinco individuos que sobrevivieron a la exposición. Las actividades de ChE y CarbE en ambas poblaciones fueron analizadas a diferentes tiempos y concentraciones de TPP. Para los anfípodos provenientes del lago 1os Barreales, la exposición durante 48 ti a 0,15 ~M de TPP produjo una inhibición significativa de ChE (45%) respecto de la actividad de los controles, pero no afectó a CarbE. Similar resultado fue observado en ChE (67,5%) de los anfípodos colectados en Fernández Oro después de 1 h de exposición a 30uM de TPP. El resto de las concentraciones y diferentes tiempos ensayados no produjeron cambias significativos en las actividades de las dos enzimas de ambas poblaciones de anfípodos. El estudio de las CarbE mediante electroforesis en gel de paliacrilamida en condiciones nativas y revelado por actividad determinó la existencia de diferentes isoformas de la enzima presentes en ambas poblaciones. El revelado delos geles en presencia de TPP demostró una significativa disminución de la actividad en una de las isoformas de !os anfípodos provenientes de F. Oro, pero aumentó la actividad de otra, lo que explicaría la ausencia de efecto neto sobre la actividad total de CarbE in vivo. Podemos concluir, que aún a concentraciones ampliamente mayores a las habitualmente usadas el TPP no es un buen inhibidor delas CarbE de anfípodos H. curvispina y, por lo tanta, no es útil para estudios de sinergismo en esta especie.