PROBIEN   20416
INSTITUTO DE INVESTIGACION Y DESARROLLO EN INGENIERIA DE PROCESOS, BIOTECNOLOGIA Y ENERGIAS ALTERNATIVAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Optimización estadística de la producción de la toxina killer de Saccharomyces eubayanus en melaza de caña: potencial aplicación como agente de biocontrol en la industria vitivinícola
Autor/es:
SANGORRÍN MARCELA PAULA; LOPES, CHRISTIAN ARIEL; LUNA LUCIANO; VILLALBA MARÍA LETICIA
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; XIII Congreso Latinoamericano de Microbiología General; 2016
Resumen:
Saccharomyces eubayanus NPCC 1302 produce una toxina killer (SeKT) que inhibe el crecimiento de levaduras contaminantes de vinos. Como potencial agente de biocontrol para su uso en enología, resulta necesario optimizar las condiciones de producción de toxina en un medio de cultivo económico. En este trabajo se propuso optimizar la producción de toxina utilizando un medio de cultivo con melaza de caña de azúcar adicionada con diferentes suplementos. En primer lugar se realizó un screening del tipo Plackett ? Burman, con el fin de seleccionar factores que influyen significativamente la producción de SeKT. Los factores analizados fueron: temperatura, velocidad de agitación y concentración de: melaza, Urea, KH2PO4, MgSO4, (NH4)2SO4, ZnSO4, Tiamina, Tritón y Glicerol. Para el análisis de Plackett-Burmann se realizaron 12 combinaciones y 2 puntos centrales. En la fase estacionaria de los cultivos de cada condición se determinaron las unidades de actividad killer (UAK) en el medio extracelular y se observó una influencia significativa de KH2PO4, MgSO4, (NH4)2SO4 y concentración de melaza sobre la producción de SeKT. El nivel óptimo cada uno de los factores significativos fue determinado usando un Diseño Central Compuesto con 16 combinaciones y 2 puntos centrales. A partir de estos resultados se seleccionaron tres condiciones: Condición I (3,36% de concentración de melaza, 0,5% KH2PO4); Condición II (6% de concentración de melaza y 0,5% de (NH4)2SO4); Condición III (4% de concentración de melaza, 0,25% de KH2PO4, 0,25% de MgSO4 y 0,25% de (NH4)2SO4) que fueron evaluadas en erlenmeyer conteniendo 1 litro de medio. En todas las condiciones se cuantificaron los parámetros UAK/ml de cultivo (12,2; 23,8 y 50 respectivamente), UAK/mg de biomasa producida (6,75; 13,13 y 13,47 respectivamente) y UAK/ mg de proteínas (1,41; 1,5 y 5,35 respectivamente). Se seleccionó finalmente la condición III para el escalado en un reactor de 15 litros. Se determinó UAK/ml (110,71 ±60,71), UAK/mg de biomasa producida (13,465 ± 1,155) y UAK/mg de proteínas (7,555 ± 3,055). Finalmente, extractos conteniendo 114,7 UA/ml fueron liofilizados durante 24hs a 0,05bar y se rehidrataron, y se comparó su actividad killer remanente con el extracto original conservado a -20°C. El extracto a -20°C presentó un 8,17% de actividad remanente, mientras que el liofilizado 67,06%. Teniendo en cuenta estos resultados, SeKT producida en un medio económico en base a melaza y liofilizada, podría ser utilizada como herramienta de biocontrol para combatir el crecimiento de levaduras contaminantes de vinos.