PROBIEN   20416
INSTITUTO DE INVESTIGACION Y DESARROLLO EN INGENIERIA DE PROCESOS, BIOTECNOLOGIA Y ENERGIAS ALTERNATIVAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
USO COMBINADO DE METODOS CONVENCIONALES Y MOLECULARES PARA LA IDENTIFICACIÓN DE Monilinia fructicola Y Monilinia laxa DEL ALTO VALLE DE RIO NEGRO Y NEUQUEN
Autor/es:
SOSA,M.C.; LOPES,C.; DOBRA,A.C.; LUTZ,M.C.; SANGORRIN,M.
Lugar:
Cordoba
Reunión:
Congreso; 1 Congreso Argentino de Fitopatologia; 2008
Institución organizadora:
Asociacion Argentina de Fitopatologia
Resumen:
En el Alto Valle de R¨ªo Negro y Neuqu¨¦n, M. fructicola no es un pat¨®geno importante, pero dificulta las exportaciones de fruta de carozo a la Uni¨®n Europea (cuarentenaria). Por las similitudes morfol¨®gicas entre las especies de Monilinia, se hace necesario el uso de herramientas de identificaci¨®n precisas que garanticen la sanidad de las   exportaciones. En este trabajo se identificaron las especies por m¨¦todos morfol¨®gicos convencionales y moleculares (secuenciaci¨®n). Se recuperaron 8 aislamientos a partir de  ciruelo y duraznos de Cinco Saltos y Gral. Roca. De acuerdo a caracter¨ªsticas morfol¨®gicas y culturales, se identificaron los aislamientos mo1: M. laxa (conidios de15,6x8,8¦Ìm, tubo germinativo corto, colonia gris-gris humo, escasa esporulaci¨®n, margen lobulado) y mo2-8: M. fructicola (conidios de 15,5 x 9,8 ¦Ìm, tubo germinativo largo, colonia beige-gris, abundante esporulaci¨®n, algunos con estromas, crecimiento conc¨¦ntrico, borde entero). De cada aislamiento se extrajo el ADN total y se amplific¨® por PCR la regi¨®n 5,8S-ITS del ADNr. En todos los casos se obtuvo un fragmento amplificado de 550 pb., el cual se purific¨® y secuenci¨®, observando una diferencia en 3 posiciones nucleot¨ªdicas entre ambas especies. Cada una mostr¨® 100% de homolog¨ªa con secuencias de las respectivas especies presentes en Genbank aisladas de diferentes lugares del mundo. La secuenciaci¨®n de la regi¨®n 5,8S-ITS confirm¨® la identidad de los aislamientos obtenida por los m¨¦todos convencionales. Para estudiar los aislamientos de M. fructicola a nivel de cepa se utiliz¨® el m¨¦todo RAPD-PCR con 6 cebadores, de los cuales s¨®lo 3 amplificaron con ¨¦xito y fueron reproducibles (OPA1, OPA11 y R3). El cebador R3 permiti¨® obtener perfiles con n¨²mero de bandas adecuado para ser utilizado en la caracterizaci¨®n intraespec¨ªfica de M. fructicola.