CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

La microscopía electrónica de transmisión (MET) es una herramienta importante en la valoración de daños submicroscópicos y localización de lesiones en espermatozoides. La criopreservación espermática afecta principalmente a las membranas celulares. El objetivo de este trabajo fue evaluar distintos diluyentes a base de tris-ácido cítrico-glucosa-yema de huevo-glicerol y el agregado de trealosa en distintas concentraciones (T, TT50, TT100 y TT200) a través del análisis de las alteraciones ultraestructurales producidas en cabezas y piezas intermedias de espermatozoides epididimarios extraídos post-morten a diferentes tiempos (0, 24, 48, 72, 120 y 168 h). El contenido escrotal proveniente de 7 ciervos colorados fue mantenido a 5 °C. Los espermatozoides obtenidos por punción de la cola del epidídimo fueron diluidos a 30 °C, refrigerados a 5 °C, congelados y almacenados en nitrógeno líquido. Luego de la descongelación se procesaron para MET. Se analizaron diferentes secciones de las cabezas, contabilizando la presencia/ausencia de membranas plasmáticas y contenido acrosomal, membrana plasmática de la pieza intermedia (intacta vs. alterada) y estado de las mitocondrias (electrodensas vs. en degeneración). Las diferencias entre muestras se analizaron mediante χ2. Los diluyentes con trealosa preservaron mejor las estructuras analizadas. Las muestras con diluyente TT50 son las que mejor preservaron las estructuras al comparar el tiempo 0 con los restantes ya que sólo se evidenció deterioro en la región acrosomal a partir de las 120 y 168 h. Para los restantes diluyentes, las estructuras espermáticas evidenciaron deterioro a partir de las 24 h (TT100), 48 h (TT200) y a las 72 h (T).