Clorpirifos Modifica La Expresión De Genes Asociados A La Función Placental

RIDANO, MAGALI E.; FLORES-MARTÍN, JÉSICA; RACCA, ANA C.; MAGNARELLI, GLADIS; GENTI-RAIMONDI, SUSANA; PANZETTA-DUTARI, GRACIELA M.

Tandil, Buenos Aires

Congreso; XVIICongreso Argentino De Toxicología.; 2011

Datos epidemiológicos revelan una asociación entre la exposición de mujeres embarazadas a pesticidas organofosforados y alteraciones en el embarazo, sin embargo los mecanismos moleculares involucrados permanecen poco explorados. Dado el rol fundamental de la placenta en el mantenimiento del embarazo, el objetivo de este trabajo fue analizar el efecto de clorpirifos (Cp) sobre la expresión de genes importantes para su función. Para tal fin, células JEG-3 y citotrofoblastos (CTB) aislados de placentas normales post-parto, se cultivaron en presencia de cantidades variables de Cp durante tiempos cortos (20-24h) y largos (48-61h). En las condiciones ensayadas, la viabilidad celular determinada mediante ensayos de MTT se mantuvo mayor al 75% para concentraciones de hasta 100mM. La tinción nuclear e inmunolocalización de desmosomas y proteínas marcadoras de diferenciación no revelaron alteraciones importantes en la morfología o la diferenciación celular. Los niveles de expresión de los transcriptos de interés se determinaron por RT-PCR a tiempo real y la expresión proteica por inmunofluorescencia y western blot. Los niveles de hormonas placentales secretadas se evaluaron mediante inmunoensayos. En el modelo de JEG-3 se encontró un aumento significativo en los niveles de mRNA y proteína bhCG, tanto intracelular como secretada. Además, se detectó un aumento en el mRNA del factor de transcripción placentario GCM1 sin modificación aparente en los niveles de mensajeros del factor de transcripción KLF6 y de transportadores ABC de membrana (ABCG2 y Pgp). Mientras que en CTB se observó un leve aumento de transcriptos bhCG a tiempos cortos, un aumento de KLF6 a tiempos de tratamiento más largos y una respuesta en los niveles de transportadores en ambas condiciones. Estos datos indican que Cp modifica la expresión de genes funcionalmente relevantes en células del trofoblasto placental y sugieren que los CTB podrían activar sistemas de defensa en respuesta a la presencia del tóxico.