EFECTOS TÓXICOS Y TRANSPORTE DE MICROCISTINA-LR EN INTESTINO DE PEJERREY PATAGÓNICO (Odontesthes hatcheri): RELACIÓN CON PROTEÍNAS TIPO-ABCC

FLAVIA BIECZYNSKI; JULIETA S. DE ANNA; DANTE A. PAZ; JIMENA, L. FRONTERA; SILVINA S.M. VILLANUEVA; CARLOS M. LUQUET

Neuquén

Congreso; V Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental SETAC Argentina; 2014

En este trabajo se estudió la participación de transportadores de defensa a múltiples xenobióticos (MXR) tipo-Abcc (Mrp) en la excreción/absorción de la cianotoxina, microcistina-LR (MCLR), en el intestino de Odontesthes hatcheri. Se incubaron sacos intestinales evertidos y no-evertidos con 1-cloro-2,4-dinitrobenceno (CDNB, 200 µM) (control) o CDNB + 1,14 µM MCLR (tratados). El conjugado de CDNB con glutatión reducido (GSH) (catalizado por glutatión-S-transferasa, GST), DNP-SG es eliminado de la célula por Abcc. MCLR inhibió significativamente el flujo de DNP-SG. En tiras de intestino incubadas con CDNB + MCLR o MK571 (inhibidor específico de Abcc), se obtuvieron curvas de inhibición vs. concentración. La concentración inhibitoria 50 (CI50) fue 3,26 µM para MCLR y 0,59 µM para MK571. Alternativamente, se estudió el efecto de MCLR en un modelo que no depende de GST. Se incubaron tiras de intestino con calceína-AM (0,25 µM) (control), agregando 2,27 µM MCLR o 3 µM MK571 en los tratados. La calceína-AM, es hidrolizada dentro de la célula, dando calceína, sustrato fluorescente de Abcc. Tanto MCLR como MK571 inhibieron significativamente el flujo de calceína. Por último, se incubaron segmentos intestinales de O. hatcheri con 1,14 µM, 2,27 µM y 6.81 µM MCLR; 3 µM MK571; 1,14 µM MCLR + 3 µM MK571; 6.81 µM MCLR + 3 µM MK571. Luego de 1 h, se midió actividad GST, proteína fosfatasas 1 y 2A y concentración de GSH. En ningún caso se observaron efectos tóxicos. Individuos de O. hatcheri intoxicados por vía oral con 5 µg MCLR/g pez, se sacrificaron a las 12 h y se fijaron fragmentos de intestino para lectinhistoquímica. Se aplicaron las lectinas WGA, ConA y DBA, con las cuales se observaron diferencias entre control e intoxicados. Los resultados indican que MCLR sería transportada fuera del enterocito por proteínas tipo-Abcc. El intestino de O. hatcheri sufre muy pocos efectos tóxicos por exposición a MCLR, aún a altas concentraciones.