INTECIN   20395
INSTITUTO DE TECNOLOGIAS Y CIENCIAS DE LA INGENIERIA "HILARIO FERNANDEZ LONG"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Síntesis de CLEAs de lipasas. Selección de las condiciones de precipitación y protocolo para una correcta determinación de actividad enzimática
Autor/es:
M.P. GUAUQUE TORRES; M. L. FORESTI; M. L. FERREIRA
Lugar:
Cón-Cón, Chile
Reunión:
Simposio; XXII Simposio Iberoamericano de Catálisis; 2010
Resumen:
Se sintetizaron CLEAs a partir de preparados comerciales en solución de lipasas de Candida antarctica B y Thermomyces lanuginosa, usando albúmina (BSA) como co-precipitante. Se evaluó su actividad en la reacción de hidrólisis de trioleína. Debido a las dificultades encontradas en la determinación de actividad por mg de la enzima libre y el biocatalizador autosoportado, se determinó la concentración en mg/ml de proteína precipitable (PP) por precipitación con (NH4)2SO4. Por otra parte, fue necesario determinar las curvas de proporcionalidad Actividad Vs Masa PP en la reacción test elegida. De igual forma, se evaluó el efecto de la concentración de  glutaraldehído en la cantidad de PP recuperada en el CLEA y en la actividad del mismo. Los resultados del análisis mostraron la importancia de la correcta determinación de la actividad por mg de CLEA para conseguir resultados comparables frente a la actividad de la enzima libre. Se determinó que altas concentraciones de entrecruzante mejoran la actividad por mg y el porcentaje de PP recuperada en el CLEA. Finalmente, se discute la importancia de lavados sucesivos de los CLEAs obtenidos para eliminar el (NH4)2SO4 remanente y evaluar el grado de entrecruzamiento de la lipasa.