Refinamiento de protocolos de experimentación animal en neurociencia

FOLTRAN, RB; DIAZ SL; TARAVINI, IRE; HOCHT, C

Las Palmas de Gran Canaria

Congreso; XIV Congreso Nacional de la Sociedad Española para las Ciencias del Animal de Laboratorio; 2017

Sociedad Española para las Ciencias del Animal de Laboratorio

Refinamiento de protocolos de experimentación animal en neurocienciaRocío B. Foltran, Christian Hocht, Irene R.E. Taravini y Silvina L. DiazEl proceso de generación de nuevas neuronas en el cerebro adulto es el tema de estudio en nuestro laboratorio, para lo cual empleamos ratones C57Bl/6 como modelo animal. Pensando en su bienestar, decidimos refinar nuestros protocolos a distintos niveles. Diversos protocolos pro- neurogénicos se basan en la administración crónica de drogas que actúan sobre el sistema serotonérgico, frecuentemente administradas por vía intraperitoneal. Si bien esta vía tiene ventajas como la inmediata absorción y la seguridad de la dosis administrada, la maniobra inflige un mínimo estímulo doloroso en los animales, representa un estrés diario y requiere personal entrenado y con pericia. Como refinamiento planteamos usar dos métodos de administración orales no invasivos. En primer lugar, administramos el antidepresivo fluoxetina (Flx), un inhibidor de la recaptación de serotonina, disuelta en agua de bebida a ratones, protocolo ya empleado por otros laboratorios. Comprobamos que la Flx era estable en agua y alcanzaba niveles en plasma dentro del rango terapéutico. Mediante estudios conductuales y neurogénicos comprobamos que la droga hizo efecto de la manera esperada. Por otro lado, administramos paraclorofenilalanina (PCPA), un inhibidor de la síntesis de serotonina, disuelta en cubos de gelatina, a modo de suplemento dietario. Medimos los niveles de serotonina en plasma, así como parámetros neurogénicos, los cuales están siendo analizados. En otro nivel de refinamiento, estudiamos las condiciones del alojamiento de los ratones. Las regulaciones internacionales recomiendan el empleo de enriquecimiento ambiental (EA), pero su interferencia con los resultados experimentales es incierta, especialmente en el área de neurociencia. En particular, se sabe que el EA produce aumentos de la neurogénesis, por lo cual, estudiamos una posible interferencia entre el EA y el tratamiento con Flx, ambos pro-neurogénicos. Para ello alojamos a los ratones con EA o en condiciones standard y recibieron Flx o vehículo durante 4 semanas. No observamos interacción entre los tratamientos al medir la proliferación de neuronas en el hipocampo, pero resta por estudiar esta combinación EA-Flx en la sobrevida neuronal. En base a nuestros resultados pudimos refinar el método de administración de las drogas. Por otro lado, los experimentos en marcha en el laboratorio nos permitirán concluir si es recomendable el uso de EA en estudios relacionados con la neurogénesis adulta.