ANÁLISIS DE LA DINÁMICA DEL CRECIMIENTO AXONAL EN CÉLULAS GANGLIONARES

SALIERNO M; IZZO F; ORTALLI AL; SCICOLONE G; ETCHENIQUE R

Huerta Grande, Córdoba, Argentina

Taller; X Taller Argentino de Neurociencias; 2008

Realizamos el seguimiento de crecimiento axonal de células ganglionaresen explantos de retina durante las primeras 24 horas de cultivo. Estosexplantos tomados de pollos prenatales del día 7, desarrollan axones quecomienzan a verse después de 9 horas de cultivo. Dada su característicade crecimiento en este tipo de cultivos dividimos los estados del axón endinámicos positivos, dinámicos negativos y estáticos. En los periodosdinámicos positivos vimos que la velocidad de crecimiento tiene unavariabilidad menor al 16,7% y entre cultivos si bien la variabilidad aumentaa un 21,9% pudimos calcular una velocidad promedio de 3,3 μm/h ± 0,7μm/h. También observamos una alta dependencia de la temperatura, por loque estos cultivos se realizaron a 37,4°C ± 0,2°C controlados en todomomento.El setup también permite el ingreso de una micropipeta para laliberación focal de drogas mediante pulsos generados por un picospritzer ypuede regularse en un radio menor a los 100μm por lo que podemoscontrastar el análisis con axones control en el mismo explanto en lugaresdel campo que no son afectados por la droga. De esta manera, pudimosanalizar moléculas solubles que varían la dinámica en el crecimiento. Enadelante, probaremos factores que varíen la velocidad de crecimientoaxonal para analizar como estos 3 estados dinámicos se modifican yanalizaremos la interacción entre moléculas solubles y en sustrato.