Disecando la Gliosis Reactiva: Papel del DAMP S100B y su receptor RAGE en la inducción de la gliosis reactiva y la propagación del daño isquémico

VILLARREAL A, SEOANE R, ANGELO F, RAMOS AJ

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2013

Los astrocitos responden al daño isquémico mediante un fenómeno de gliosis reactiva (GR). La GR exacerbada induce neurodegeneración pero los mecanismos moleculares que subyacen la conversión de astrocitos hacia el fenotipo reactivo no están esclarecidos. En situaciones de injuria cerebral los niveles de moléculas del tipo DAMP (Damage Associated Molecular Pattern) como S100B aumentan generando neuroinflamación. Nuestra hipótesis de trabajo propone que S100B sería capaz de inducir cambios en astrocitos hacia un fenotipo reactivo contribuyendo a sostener la GR. Expusimos cultivos primarios de astrocitos corticales a distintas dosis de S100B por distintos tiempos para luego realizar ensayos de inmunofluorescencia y western blot. Observamos un aumento en la expresión de marcadores como GFAP y Vimentina, acompañado de un proceso de filamentación, migración y proliferación celular (evidenciada por incorporación de Brdu). Estos cambios fueron bloqueados utilizando un anticuerpo neutralizante del receptor RAGE e inhibición de NFKB. S100B induce la activación de este factor de transcripción en forma RAGE dependiente. S100B también logro prevenir la muerte de astrocitos expuestos a peróxido de hidrogeno en forma Erk/Akt dependiente. La inyección de S100B intracortical en ratas adultas reprodujo lo observado en un modelo de isquemia cerebral y lo esperado según nuestros resultados in vitro: aumento en la inmunomarcación para GFAP y Vimentina en el área circundante a la inyección. Mostramos aquí que S100B es capaz de modificar la morfología astroglial hacia un fenotipo reactivo aumentando también la sobrevida. La ruta de señalización S100B/RAGE/NFkB parece ser fundamental para la hipertrofia, proliferación y migración astroglial hacia la zona de injuria. De esta manera proponemos que el control de la activación astroglial por moléculas del tipo DAMP emerge como nuevo blanco terapéutico para la homeostasis de la unidad neurovascular. PIP CONICET, PICT2008-1590, UBACYT