LOS RECEPTORES PARA LA NEUROTENSINA DE ALTA AFINIDAD PERO NO LOS DE BAJA AFINIDAD ESTÁN INVOLUCRADOS EN LA INHIBICIÓN DE LA Na+, K+-ATPasa NEURONAL POR EL PÉPTIDO.

A. GUTNISKY; A. ALVAREZ JULIÁ; M.G. LÓPEZ ORDIERES; G. RODRÍGUEZ DE LORES ARNAIZ

Rosario, Prov. de Santa Fe

Congreso; Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Fisiologia; 2012

Sociedad Argentina de Fisiolog¨ªa

La neurotensina es un tridecap¨¦ptido que puede actuar como neuromodulador o como neurotransmisor, que se une a un grupo de receptores. Dos de ellos, denominados NTS1 y NTS2, unen a la neurotensina con alta y baja afinidad, respectivamente. A nivel del sistema nervioso central, la neurotensina participa en distintas funciones como la locomoci¨®n, la modulaci¨®n del estr¨¦s, el dolor y la analgesia profunda, entre otras.  La neurotensina act¨²a como agonista en todas las v¨ªas mediadas por el receptor NTS1. La  Na/K-ATPasa es una enzima transmembrana, esencial para el mantenimiento y recuperaci¨®n de los gradientes i¨®nicos. El agregado de neurotensina in vitro inhibe la actividad de la Na/K-ATPasa de las membranas sinaptosomales, efecto en el que se encontrar¨ªa involucrado el receptor NTS1. El presente estudio tuvo por objetivo profundizar el conocimiento de la participaci¨®n de los receptores a la neurotensina en la acci¨®n sobre la Na/K-ATPasa. Se emplearon el SR 48692 (Sanofi-Aventis, U.S., Inc.) y la levocabastina, respectivamente antagonistas para los receptores NTS1 y NTS2. Lotes de seis ratas Wistar macho se emplearon para cada experimento. Las ratas se administraron por v¨ªa i.p. con 150 ¦Ìg/kg de SR 48692 resuspendido en veh¨ªculo (0,01% Tween 80 en soluci¨®n fisiol¨®gica), o 50 ¦Ìg/kg de levocabastina (disuelta en soluci¨®n fisiol¨®gica) y las correspondientes soluciones de veh¨ªculo. A los treinta minutos, se sacrificaron los animales, las cortezas cerebrales se disecaron, se homogeneizaron y sometieron a centrifugaci¨®n diferencial y en gradiente para purificar las membranas sinaptosomales. En estas membranas se determin¨® la actividad de Na/K- y Mg-ATPasas. Los ensayos se realizaron en ausencia y presencia de neurotensina. La actividad basal de Na/K- y Mg-ATPasa en membranas aisladas de ratas inyectadas con veh¨ªculo era de 33,7 y 14,8 mmoles de fosfato inog¨¢nico liberado por mg de prote¨ªna por hora, respectivamente. La presencia de 3,5 x 10-6 M de neurotensina disminuy¨® aproximadamente 50% la actividad de Na/K-ATPasa en membranas aisladas de ratas inyectadas con veh¨ªculo. El efecto inhibitorio de la neurotensina sobre la actividad de Na/K-ATPasa se previno totalmente por la administraci¨®n del SR 48692 pero no se alter¨® por la administraci¨®n de levocabastina. Los resultados representan una nueva evidencia de que la acci¨®n del p¨¦ptido sobre la enzima ocurre a trav¨¦s del receptor NTS1 pero no del receptor NTS2. La neurotensina es un tridecap¨¦ptido que puede actuar como neuromodulador o como neurotransmisor, que se une a un grupo de receptores. Dos de ellos, denominados NTS1 y NTS2, unen a la neurotensina con alta y baja afinidad, respectivamente. A nivel del sistema nervioso central, la neurotensina participa en distintas funciones como la locomoci¨®n, la modulaci¨®n del estr¨¦s, el dolor y la analgesia profunda, entre otras.  La neurotensina act¨²a como agonista en todas las v¨ªas mediadas por el receptor NTS1. La  Na/K-ATPasa es una enzima transmembrana, esencial para el mantenimiento y recuperaci¨®n de los gradientes i¨®nicos. El agregado de neurotensina in vitro inhibe la actividad de la Na/K-ATPasa de las membranas sinaptosomales, efecto en el que se encontrar¨ªa involucrado el receptor NTS1. El presente estudio tuvo por objetivo profundizar el conocimiento de la participaci¨®n de los receptores a la neurotensina en la acci¨®n sobre la Na/K-ATPasa. Se emplearon el SR 48692 (Sanofi-Aventis, U.S., Inc.) y la levocabastina, respectivamente antagonistas para los receptores NTS1 y NTS2. Lotes de seis ratas Wistar macho se emplearon para cada experimento. Las ratas se administraron por v¨ªa i.p. con 150 ¦Ìg/kg de SR 48692 resuspendido en veh¨ªculo (0,01% Tween 80 en soluci¨®n fisiol¨®gica), o 50 ¦Ìg/kg de levocabastina (disuelta en soluci¨®n fisiol¨®gica) y las correspondientes soluciones de veh¨ªculo. A los treinta minutos, se sacrificaron los animales, las cortezas cerebrales se disecaron, se homogeneizaron y sometieron a centrifugaci¨®n diferencial y en gradiente para purificar las membranas sinaptosomales. En estas membranas se determin¨® la actividad de Na/K- y Mg-ATPasas. Los ensayos se realizaron en ausencia y presencia de neurotensina. La actividad basal de Na/K- y Mg-ATPasa en membranas aisladas de ratas inyectadas con veh¨ªculo era de 33,7 y 14,8 mmoles de fosfato inog¨¢nico liberado por mg de prote¨ªna por hora, respectivamente. La presencia de 3,5 x 10-6 M de neurotensina disminuy¨® aproximadamente 50% la actividad de Na/K-ATPasa en membranas aisladas de ratas inyectadas con veh¨ªculo. El efecto inhibitorio de la neurotensina sobre la actividad de Na/K-ATPasa se previno totalmente por la administraci¨®n del SR 48692 pero no se alter¨® por la administraci¨®n de levocabastina. Los resultados representan una nueva evidencia de que la acci¨®n del p¨¦ptido sobre la enzima ocurre a trav¨¦s del receptor NTS1 pero no del receptor NTS2. La neurotensina es un tridecap¨¦ptido que puede actuar como neuromodulador o como neurotransmisor, que se une a un grupo de receptores. Dos de ellos, denominados NTS1 y NTS2, unen a la neurotensina con alta y baja afinidad, respectivamente. A nivel del sistema nervioso central, la neurotensina participa en distintas funciones como la locomoci¨®n, la modulaci¨®n del estr¨¦s, el dolor y la analgesia profunda, entre otras.  La neurotensina act¨²a como agonista en todas las v¨ªas mediadas por el receptor NTS1. La  Na/K-ATPasa es una enzima transmembrana, esencial para el mantenimiento y recuperaci¨®n de los gradientes i¨®nicos. El agregado de neurotensina in vitro inhibe la actividad de la Na/K-ATPasa de las membranas sinaptosomales, efecto en el que se encontrar¨ªa involucrado el receptor NTS1. El presente estudio tuvo por objetivo profundizar el conocimiento de la participaci¨®n de los receptores a la neurotensina en la acci¨®n sobre la Na/K-ATPasa. Se emplearon el SR 48692 (Sanofi-Aventis, U.S., Inc.) y la levocabastina, respectivamente antagonistas para los receptores NTS1 y NTS2. Lotes de seis ratas Wistar macho se emplearon para cada experimento. Las ratas se administraron por v¨ªa i.p. con 150 ¦Ìg/kg de SR 48692 resuspendido en veh¨ªculo (0,01% Tween 80 en soluci¨®n fisiol¨®gica), o 50 ¦Ìg/kg de levocabastina (disuelta en soluci¨®n fisiol¨®gica) y las correspondientes soluciones de veh¨ªculo. A los treinta minutos, se sacrificaron los animales, las cortezas cerebrales se disecaron, se homogeneizaron y sometieron a centrifugaci¨®n diferencial y en gradiente para purificar las membranas sinaptosomales. En estas membranas se determin¨® la actividad de Na/K- y Mg-ATPasas. Los ensayos se realizaron en ausencia y presencia de neurotensina. La actividad basal de Na/K- y Mg-ATPasa en membranas aisladas de ratas inyectadas con veh¨ªculo era de 33,7 y 14,8 mmoles de fosfato inog¨¢nico liberado por mg de prote¨ªna por hora, respectivamente. La presencia de 3,5 x 10-6 M de neurotensina disminuy¨® aproximadamente 50% la actividad de Na/K-ATPasa en membranas aisladas de ratas inyectadas con veh¨ªculo. El efecto inhibitorio de la neurotensina sobre la actividad de Na/K-ATPasa se previno totalmente por la administraci¨®n del SR 48692 pero no se alter¨® por la administraci¨®n de levocabastina. Los resultados representan una nueva evidencia de que la acci¨®n del p¨¦ptido sobre la enzima ocurre a trav¨¦s del receptor NTS1 pero no del receptor NTS2. La neurotensina es un tridecap¨¦ptido que puede actuar como neuromodulador o como neurotransmisor, que se une a un grupo de receptores. Dos de ellos, denominados NTS1 y NTS2, unen a la neurotensina con alta y baja afinidad, respectivamente. A nivel del sistema nervioso central, la neurotensina participa en distintas funciones como la locomoci¨®n, la modulaci¨®n del estr¨¦s, el dolor y la analgesia profunda, entre otras.  La neurotensina act¨²a como agonista en todas las v¨ªas mediadas por el receptor NTS1. La  Na/K-ATPasa es una enzima transmembrana, esencial para el mantenimiento y recuperaci¨®n de los gradientes i¨®nicos. El agregado de neurotensina in vitro inhibe la actividad de la Na/K-ATPasa de las membranas sinaptosomales, efecto en el que se encontrar¨ªa involucrado el receptor NTS1. El presente estudio tuvo por objetivo profundizar el conocimiento de la participaci¨®n de los receptores a la neurotensina en la acci¨®n sobre la Na/K-ATPasa. Se emplearon el SR 48692 (Sanofi-Aventis, U.S., Inc.) y la levocabastina, respectivamente antagonistas para los receptores NTS1 y NTS2. Lotes de seis ratas Wistar macho se emplearon para cada experimento. Las ratas se administraron por v¨ªa i.p. con 150 ¦Ìg/kg de SR 48692 resuspendido en veh¨ªculo (0,01% Tween 80 en soluci¨®n fisiol¨®gica), o 50 ¦Ìg/kg de levocabastina (disuelta en soluci¨®n fisiol¨®gica) y las correspondientes soluciones de veh¨ªculo. A los treinta minutos, se sacrificaron los animales, las cortezas cerebrales se disecaron, se homogeneizaron y sometieron a centrifugaci¨®n diferencial y en gradiente para purificar las membranas sinaptosomales. En estas membranas se determin¨® la actividad de Na/K- y Mg-ATPasas. Los ensayos se realizaron en ausencia y presencia de neurotensina. La actividad basal de Na/K- y Mg-ATPasa en membranas aisladas de ratas inyectadas con veh¨ªculo era de 33,7 y 14,8 mmoles de fosfato inog¨¢nico liberado por mg de prote¨ªna por hora, respectivamente. La presencia de 3,5 x 10-6 M de neurotensina disminuy¨® aproximadamente 50% la actividad de Na/K-ATPasa en membranas aisladas de ratas inyectadas con veh¨ªculo. El efecto inhibitorio de la neurotensina sobre la actividad de Na/K-ATPasa se previno totalmente por la administraci¨®n del SR 48692 pero no se alter¨® por la administraci¨®n de levocabastina. Los resultados representan una nueva evidencia de que la acci¨®n del p¨¦ptido sobre la enzima ocurre a trav¨¦s del receptor NTS1 pero no del receptor NTS2. La neurotensina es un tridecap¨¦ptido que puede actuar como neuromodulador o como neurotransmisor, que se une a un grupo de receptores. Dos de ellos, denominados NTS1 y NTS2, unen a la neurotensina con alta y baja afinidad, respectivamente. A nivel del sistema nervioso central, la neurotensina participa en distintas funciones como la locomoci¨®n, la modulaci¨®n del estr¨¦s, el dolor y la analgesia profunda, entre otras.  La neurotensina act¨²a como agonista en todas las v¨ªas mediadas por el receptor NTS1. La  Na/K-ATPasa es una enzima transmembrana, esencial para el mantenimiento y recuperaci¨®n de los gradientes i¨®nicos. El agregado de neurotensina in vitro inhibe la actividad de la Na/K-ATPasa de las membranas sinaptosomales, efecto en el que se encontrar¨ªa involucrado el receptor NTS1. El presente estudio tuvo por objetivo profundizar el conocimiento de la participaci¨®n de los receptores a la neurotensina en la acci¨®n sobre la Na/K-ATPasa. Se emplearon el SR 48692 (Sanofi-Aventis, U.S., Inc.) y la levocabastina, respectivamente antagonistas para los receptores NTS1 y NTS2. Lotes de seis ratas Wistar macho se emplearon para cada experimento. Las ratas se administraron por v¨ªa i.p. con 150 ¦Ìg/kg de SR 48692 resuspendido en veh¨ªculo (0,01% Tween 80 en soluci¨®n fisiol¨®gica), o 50 ¦Ìg/kg de levocabastina (disuelta en soluci¨®n fisiol¨®gica) y las correspondientes soluciones de veh¨ªculo. A los treinta minutos, se sacrificaron los animales, las cortezas cerebrales se disecaron, se homogeneizaron y sometieron a centrifugaci¨®n diferencial y en gradiente para purificar las membranas sinaptosomales. En estas membranas se determin¨® la actividad de Na/K- y Mg-ATPasas. Los ensayos se realizaron en ausencia y presencia de neurotensina. La actividad basal de Na/K- y Mg-ATPasa en membranas aisladas de ratas inyectadas con veh¨ªculo era de 33,7 y 14,8 mmoles de fosfato inog¨¢nico liberado por mg de prote¨ªna por hora, respectivamente. La presencia de 3,5 x 10-6 M de neurotensina disminuy¨® aproximadamente 50% la actividad de Na/K-ATPasa en membranas aisladas de ratas inyectadas con veh¨ªculo. El efecto inhibitorio de la neurotensina sobre la actividad de Na/K-ATPasa se previno totalmente por la administraci¨®n del SR 48692 pero no se alter¨® por la administraci¨®n de levocabastina. Los resultados representan una nueva evidencia de que la acci¨®n del p¨¦ptido sobre la enzima ocurre a trav¨¦s del receptor NTS1 pero no del receptor NTS2.