RELACIONES FUNCIONALES ENTRE BRACHYURY Y HAIRY2 EN EL DESARROLLO DEL EJE DORSO-VENTRAL DE XENOPUS LAEVIS

CECILIA E. AGUIRRE, SABRINA MURGAN, ANDRÉS CARRASCO, SILVIA LÓPEZ

Mar del Plata

Congreso; LVI REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011

Hairy2 es un represor transcripcional de la familia HES, es un efector de Notch y está involucrado en el establecimiento de límites en tejidos neurales. La sobreexpresión de hairy2 reprime la expresión de marcadores de la línea media dorsal (DML) como chordin y foxA4a y promueve su expresión ectópica en la zona marginal ventrolateral (VLMZ). Sin embargo, reprime la expresión del marcador panmesodérmico brachyury (bra) en todas las localizaciones. El bloqueo de hairy2 produce un aumento en los niveles de transcriptos de bra. Bra es un activador transcripcional de la familia T-box que activa a genes específicos del mesodermo y promueve su movimiento de convergencia y extensión. Para investigar las relaciones funcionales existentes entre bra y hairy2 en el desarrollo del eje dorso-ventral, realizamos experimentos de ganancia o pérdida de función y análisis morfológicos y de marcadores moleculares por medio de hibridización in situ (ISH). Nuestros resultados indican que la sobreexpresión dorsal de bra reprime a hairy2. En cambio, la interferencia de su función por medio de la inyección de ARNm de bra-EnR (una construcción que transforma a Brachyury en un represor activo) expande el dominio de hairy2 vegetalmente en regiones correspondientes a la VLMZ. Notablemente, al igual que la sobreexpresión de hairy2, bra-EnR promueve la expresión ectópica de marcadores de DML en esta región. Esto resulta en la formación de ejes secundarios que poseen tubo neural (sox2; nrp1) con cerebro medio y posterior (en2; krox20) pero que carecen de cerebro anterior (no expresan otx2). En conjunto, nuestros datos indican que hairy2 y bra estarían involucrados en un mecanismo regulatorio de represión mutua. La expresión de bra en la VLMZ es necesaria para impedir la expansión de hairy2 vegetalmente, inhibiendo la aparición de ejes secundarios. Este control a nivel cigótico a cargo de bra asegura el desarrollo normal del embrión.