EFECTO DE LA ADAPTACIÓN A BILIS DE L. delbrueckii subsp. lactis 200 SOBRE SU CAPACIDAD DE INTERACCIÓN CON EL INTESTINO

BURNS, P.; VINDEROLA, G.; SUAREZ, V.; REINHEIMER J.A.

CABA

Congreso; XIII Congreso Cytal; 2011

En trabajos previos obtuvimos derivados resistentes a sales biliares a partir de cepas de Lactobacillus delbrueckii de origen no intestinal. El objetivo de este trabajo fue estudiar el impacto de la adaptación a bilis de L. delbrueckii subsp. lactis 200 y su derivado resistente a bilis (L. delbrueckii subsp. lactis 200+) sobre la morfología celular, la capacidad autoagregante, la interacción con el intestino y la capacidad de activar la respuesta inmune en ratones. Los estudios de morfología celular se realizaron mediante microscopía electrónica de barrido y transmisión. El fenómeno de autoagregación (agregación macroscópica de células y precipitación de flóculos) se observó durante 30 min y se registró fotográficamente. Para los estudios de interacción de bacterias marcadas con el intestino ratones BALB/c recibieron 108 células marcadas con FITC por intubación intragástrica, se sacrificaron por dislocación cervical luego de 10, 30 ó 60 min y se extrajo la porción distal del intestino delgado para su procesamiento histológico y posterior análisis. La capacidad de activación de la respuesta inmune se evaluó mediante la determinación de la actividad fagocítica de macrófagos peritoneales y el número de células productoras de IgA en lámina propia de intestino delgado (por inmunohistoquímica) en ratones BALB/c que recibieron durante 3, 6 ó 10 días consecutivos aprox. 5 x 107 UFC de cada cepa. Por microscopía electrónica de barrido se observó que las células del derivado resistente a bilis desarrolladas en presencia de sales biliares presentaron una morfología elongada respecto a la cepa original. Por otro lado, mediante microscopía de transmisión se observó una desorganización de la membrana celular que se evidenció por irregularidad en su trazado. El estudio in vivo de interacción con el intestino delgado empleando células viables marcadas con FITC permitió verificar que la mayor capacidad autoagregante de la cepa original (observada in vitro), se perdió parcialmente en el derivado resistente a bilis cuando el mismo desarrolló en caldo MRS adicionado de 0,5% de sales biliares. En relación a la capacidad de las cepas de activar la respuesta inmune se observó que no hubo diferencias significativas entre la cepa original y el derivado resistente a bilis en la actividad  fagocítica de macrófagos peritoneales. Ambas cepas fueron capaces de inducir un incremento en el número de células productoras de IgA en lámina propia de intestino delgado. L. delbrueckii subsp. lactis 200 fue capaz de inducir un aumento significativo de este parámetro para todos los períodos de alimentación, con una tendencia al máximo hacia el día 10. Sin embargo, el derivado resistente a bilis fue capaz de inducir el aumento de IgA para los días 6 y 10 de alimentación. La adaptación a sales biliares redujo la capacidad autoagregante, persistencia en intestino y capacidad inmunomoduladora del derivado resistente.