INVESTIGADORES
RUMBO Martin
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis de poblaciones celulares linfoides y mieloides en mucosa intestinal humana
Autor/es:
DOMINIK MEIER; HERNÁN CAGNOLA; MARTIN RAUDA; ANDRES RUF; LISANDRO BITETTI; GUILLERMO DOCENA; FERNANDO CHIRDO; GONDOLESI GABRIEL; MARTIN RUMBO
Lugar:
La Falda, Cordoba, Argentina
Reunión:
Congreso; LX reunión anual de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2008
Resumen:
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El intestino delgado se caracteriza por la presencia de tejido linfoide organizado con funciones inductoras de respuesta inmune: Placas de Peyer y folículos linfoides asilados. Por otra parte en la lámina propria existen distintas poblaciones leucocitarias con capacidad de inducción de respuesta inmune y funciones efectoras. Gran parte del conocimiento al respecto ha sido generado en ratón, siendo muy escasa la información disponible de mucosa intestinal humana.
El objetivo de este trabajo fue optimizar la metodología de análisis de poblaciones celulares leucocitarias de mucosa intestinal humana.
Metodología: Se estudiaron piezas quirúrgicas removidas de distintas porciones de intestino delgado (n=11). Se optimizó un protocolo de separación mecánica de la capa mucosa de la submucosa en etapas, que permitió el reconocimiento de abundantes estructuras linfoides tanto en duodeno como en ileon. Se detectaron clusters de células CD20+ en estas estructuras, siendo compatibles con folículos linfoides aislados. Piezas de tejido libres de estructuras linfoides fueron empleadas para el análisis de poblaciones celulares. Por lavados con EDTA 5 mM se separó el epitelio de la lámina propira, siendo ambas fracciones digeridas y analizadas por citometría de flujo.
Resultados: El compartimento epitelial presentó una apreciable población linfoide con mayoría de células T CD8+, correspondiendo a linfocitos intraepiteliales. También se detectó una población de mayor tamaño, CD11c+CD11b+ que constituiría una población mieloide que es removida del tejido por el tratamiento con EDTA.
En la lámina propria se detectaron poblaciones linfoides CD3+CD4+ y CD20+CD19+, así como células CD11c+CD11b+
Conclusión: Se optimizó un protocolo para separación de la capa mucosa intestinal y la identificación de estructuras linfoides y se optimizaron protocolos de análisis de compartimentos celulares de la mucosa: epitelial y lámina propria. Estos métodos permitirán el estudio de estas poblaciones celulares en distintas situaciones fisiopatológicas.