Diseño de un proceso de producción masiva de proteinas recombinantes en larvas de lepidópteros

LEVIN, G.; LOUSTAU, M.; ROMERO, L.; NAVARRO, A.; MIRANDA, M. V.; CASCONE, O.

Buenos Aires

Congreso; 4º Congreso y Exposición de Tecnología Farmacéutica (ETIF 2006); 2006

La utilización de larvas de Lepidópteros como biofábricas permite obtener altos niveles de proteínas recombinantes a bajo costo. Las larvas de Rachiplusia nu son susceptibles a la infección con el virus de la poliedrosis nuclear Autographa californica (AcMNPV), pudiéndose infectar inyectando virus brotado en hemolinfa o por alimentación con poliedros. La infección oral es menos laboriosa, especialmente cuando se cuenta con un gran número de insectos. Se ha estudiado la expresión y purificación de peroxidasa de Armoracia rusticana (horseradish peroxidase, HRP C) como proteína modelo en larvas de insectos. La secuencia genética de la HRP se modificó en ambos extremos para  facilitar el downstream processing por aplicación directa del extracto crudo a matrices de intercambio iónico y afinidad. Además se ensayaron dos estrategias para la obtención de baculovirus pol+ para la infección por vía oral de larvas mientras se alimentan con dietas artificiales en el laboratorio. Se obtuvo un nivel de expresión de HRP de 288,2 mg/Kg y se purificó con un rendimiento de 89,2%. Este esquema de trabajo puede aplicarse para la producción de otras proteínas de interés para la industria farmacéutica.