INTERFERÓN RECOMBINANTE PARA MASCOTAS PRODUCIDO EN LARVAS DE INSECTOS

ALEXANDRA TARGOVNIK; VILLAVERDE MARCELA; MARIANA BERNADETT ARREGUI; MARÍA CURATOLA; MARIELA FOGAR; GLIKIN GERARDO; FINOCCHIARO; CASCONE OSVALDO; MARIA V MIRANDA

Congreso; ETIF 2014; 2014

El interferón felino (FeIFN) es una citoquina que se aplica en la industria veterinaria para el tratamiento y prevención de enfermedades virales y neoplasias de origen felino y canino y que no se comercializa en nuestro país. El objetivo de este trabajo fue producir FeIFN recombinante (rFeIFN) en el sistema baculovirus-larvas de Rachiplusia nu. Se construyó un baculovirus recombinante donde el gen de FeIFN fue clonado bajo el promotor de poliedrina y el péptido de secreción de origen viral GP67. Por otra parte, se modificó el punto isoeléctrico (pI) del rFeIFN mediante el agregado de una etiqueta de 8 argininas en su extremo carboxilo. El nivel de expresión obtenido a partir de larvas de R. nu infectadas fue de (3.7±0.3) x 106 U/larva. El pI del rFeIFN varió de 6,5 a 9,15 y este cambio no afectó su actividad biológica. Finalmente, el rFeIFN fue purificado por cromatografía de intercambio iónico (HiTrap SP Fast Flow 1 ml, GE Healthcare) a pH 7,0, seguido de una cromatografía de interacción hidrofóbica (Phenyl Sepharose Fast Flow High sub, 1 ml, GE Healthcare). Se obtuvo una proteína libre de partículas virales. Los resultados obtenidos alientan el desarrollo de esta plataforma biotecnológica para la producción de interferones de uso veterinario basada en larvas de R. nu.