Interaccion de Hormonas Tiroideas con bicapas lipidicas: evidencias de la formaci¡¡ì®n de un nuevo intermediario

ISSE BLANCA; FARIAS RICARDO N.; RODRIGUEZ ARRONDO JOS¡§¦ LUIS; CHEHIN ROSANA

Carlos Paz- Cordoba (Argentina)

Congreso; XXXIV Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Biofisica; 2005

Sociedad Argentina deBiofisica

Resultados previos de nuestro laboratorio permitieron caracterizar la interacci¨®n de las hormonas tiroideas con ves¨ªculas lip¨ªdicas artificiales con el objeto de dilucidar aspectos b¨¢sicos de los efectos extranucleares de estas hormonas. L-T2, L-T3 y L-T4 son capaces de incorporarse a bicapas lip¨ªdicas s¨®lo cuando estas se encuentran en fase l¨ªquido cristalino alterando importantes propiedades fisico-qu¨ªmicas de las mismas como fluidez, permeabilidad y temperatura de transici¨®n de fases. Cuando las bicapas se encuentran en fase gel o l¨ªquido-ordenado, solo L-T3 es capaz de incorporarse. Una vez en la monocapa externa, L-T3 es capaz de sufrir difusi¨®n transversal y la velocidad de este proceso var¨ªa con la fluidez de la bicapa. Estos estudios fueron confirmados. por diferentes t¨¦cnicas biof¨ªsicas como espectroscopia de fluorescencia, calorimetr¨ªa diferencial de barrido y capas monomoleculares lip¨ªdicas. En el presente estudio se utiliz¨® la espectroscopia de infrarrojo con transformada de Fourier, para monitorear la interacci¨®n de las hormonas tiroideas con las bicapas lip¨ªdicas. Esta t¨¦cnica permite evaluar en un mismo espectro los cambios que ocurren a niveles hidrof¨®bico, interfacial y polar sin el uso de sondas. La incorporaci¨®n de las hormonas tiroideas a las bicapas induce cambios en las frecuencias de  vibraciones de estiramientos C-H de las cadenas ac¨ªlicas de los fosfol¨ªpidos alterando la temperatura de transici¨®n gel¡úl¨ªquido cristalino, de acuerdo con resultados previos obtenidos por espectroscopia de fluorescencia y DSC.  En el caso de LT4 y LT2, la incorporaci¨®n de las hormonas en un gradiente de temperaturas, se observa  en el rango de la pretransici¨®n de fases y la cooperatividad del proceso s¨®lo se puede estudiar durante los procesos de enfriamiento. La banda m¨¢s importante para estudiar el comportamiento de la regi¨®n interfacial proviene del modo vibracional de estiramiento de los esteres carbonilo. Luego de la incorporaci¨®n de las hormonas a la bicapa, desaparece esta banda con la aparici¨®n concomitante de una nueva  banda a una frecuencia  de 1559 cm ¨C1. La desconvoluci¨®n de la banda de los carbonilos resulta normalmente en dos componentes, un componente de alta frecuencia, asignable a poblaciones de carbonilos capaces de formar puentes hidr¨®geno con el agua de la interfase y una poblaci¨®n de baja frecuencia asignable a la poblaci¨®n menos hidratada. La presencia de L-T2 y L-T4 en la interfase produce una banda de tres componentes cuya composici¨®n relativa var¨ªa con la temperatura. Este proceso no es reversible, ya que cuando las ves¨ªculas retornan a la fase gel la nueva banda no desaparece. Los presentes resultados indican que la inserci¨®n  de mol¨¦culas de hormonas tiroideas entre las mol¨¦culas de DPPC inducir¨ªan la formaci¨®n de un nuevo enlace, probablemente entre el carbonilo de los fosfol¨ªpidos y la alanina de la hormona cuya frecuencia de vibraci¨®n estar¨ªa centrada en 1559 cm-1. Su asignaci¨®n se discute. Estos resultados tendr¨ªan gran relevancia fisiol¨®gica, ya que recientemente se sugiri¨® que en vertebrados, las hormonas tiroideas son componentes naturales de las membranas.