Distribución e identificación de blancos moleculares de un compuesto peptídico inhibidor de la caseína kinasa 2 (CK2) en células transformadas por papilomavirus humano (HPV)

BENAVENT ACERO F; PERERA Y; ACEVEDO BE; GOMEZ DE; ALONSO DF; PEREA SE; FARINA HG

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2008

SAIC

La enzima CK2 es una serina-treonina quinasa implicada en múltiples funciones celulares, como así también en transformación y tumorigénesis. Si bien se desconocen los blancos moleculares precisos, una actividad elevada de CK2 ha sido asociada a transformación maligna y agresividad tumoral. Además, esta enzima es capaz de activar por fosforilación a la oncoproteína E7 en células infectadas con HPV. Debido a ésto, CK2 se ha convertido en un blanco terapéutico novedoso para el tratamiento del cáncer. Previamente demostramos la actividad antitumoral del péptido CIGB-300 (P15-Tat) mediante su aplicación intralesional en tumores subcutáneos inducidos por células HeLa de carcinoma cérvicouterino humano en ratones atímicos. El compuesto fue diseñado para unirse específicamente al dominio ácido de la enzima CK2 e inhibir su actividad. En este trabajo, investigamos el posible mecanismo de acción del CIGB-300, su biodistribución locorregional en el mismo modelo xenogénico y la inducción de apoptosis. Utilizando una variante peptídica unida a biotina del CIGB-300 y revelando con fluoresceína-estreptavidina, identificamos la presencia del compuesto en el tumor y ganglios linfáticos luego de una única dosis intralesional de 8 mg/kg. Se observó una marcación intensa hasta 12 h post-administración y la señal permaneció visible durante 24 h. Secciones de tumor derivadas de animales tratados con 5 dosis diarias de 40 mg/Kg evidenciaron un fuerte incremento de la apoptosis, detectada por la técnica de TUNEL. Se estudió también la localización subcelular del CIGB-300 y la enzima CK2 sobre monocapas de células HeLa. Mediante microscopía confocal se identificó al compartimiento nucleolar como el principal sitio de acumulación intracelular del péptido, interaccionando principalmente con B23/nucleofosmina, una proteína encargada de la biogénesis ribosomal que es fosforilada y activada por CK2. Los resultados preclínicos obtenidos sugieren la potencial utilidad terapéutica del compuesto CIGB-300 en lesiones y tumores inducidos por HPV.