Evaluación del efecto antitumoral de la vacuna NeuGcGM3/VSSP en un modelo murino de melanoma con expresión estable de gangliósidos glicolilados

SEGATORI VI; OTERO LL; GOMEZ DE; ALONSO DF; GABRI MR

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2008

SAIC

Los ácidos siálicos son azúcares de 9 carbonos que forman parte de los gangliósidos, miembros de la familia de los glicoesfingolípidos. La síntesis del ácido siálico N-glicolilado (NeuGc), una variante altamente expresada en melanoma humano, es realizada por la enzima CMP-NeuAc hidroxilasa (CMAH). En ratones, los tejidos normales expresan la enzima CMAH, mientras que los tejidos tumorales por lo general no lo hacen. Por lo tanto, los modelos murinos son de limitada utilidad para evaluar terapias vacunales contra NeuGc por no expresar el antígeno blanco. Mediante técnicas de clonación de la secuencia  CMAH y transfección por lipofección, fue posible desarrollar a partir de la línea de melanoma murino B16, una población de células con expresión estable de NeuGc (B16-H). La síntesis de NeuGc derivó en una marcada presencia del gangliósido NeuGcGM3 en la superficie celular. La capacidad proliferativa de las células B16-H duplicó la registrada por la línea B16 parental (p<0,001, t test), mientras que mostró un perfil migratorio in vitro alterado. En ratones singénicos C57bl/6, se alcanzó el 100% de toma tumoral con la inyección de 5x105 células B16-H, mientras que en la línea parental este valor se alcanzó con un desafío de 1x104. Los animales fueron preinmunizados con 4 dosis quincenales de 200 μg/dosis de la vacuna NeuGcGM3/VSSP (provista por el Centro de Inmunología Molecular de La Habana, Cuba) y desafiados con un inóculo de 2x104 de células B16-H. Ningún ratón vacunado mostró desarrollo tumoral, mientras que en el lote control la incidencia fue del 80% (p<0,01, Fischer´s test). Complementariamente, a fin de desarrollar líneas con expresión variable de NeuGcGM3, se procedió a establecer poblaciones clonales a partir de la línea B16-H. Los resultados muestran el desarrollo de un novedoso modelo de melanoma murino con expresión de NeuGc, de utilidad para la evaluación preclínica de vacunas contra este tipo de gangliósidos.