Modificación del comportamiento del melanoma B16 asociada a la presencia de residuos de ácido siálico glicolilado en la superficie celular

L OTERO; MR GABRI; V SEGATORI; DE GOMEZ; DF ALONSO

Mar del Plata

Congreso; 51° Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006

SAIC

Los ácidos siálicos son componentes esenciales del glicocálix considerados antígenos tumorales, que participan en adhesión, migración y señalización celular. En este trabajo, se evaluaron en el melanoma B16 los efectos del agregado de mucina rica en NeuGc, un residuo escaso en la superficie de las células tumorales murinas. Se preincubaron células B16 en presencia de mucina (B16-mucina) en dosis de 250-500 ug/ml y se estudió su comportamiento in vitro e in vivo. El agregado de mucina incrementó durante al menos 24-48 h la presencia de NeuGc en la superficie celular detectado con el anticuerpo específico 14F7 y aumentó la adhesión celular in vitro (p<0.01). Al ser inoculadas in vivo en ratones singénicos C57BL/6, las células B16-mucina tuvieron una latencia tumoral más corta luego del desafío s.c. (B16: 12.8 ± 1.6 vs B16-mucina: 8.4 ± 0.6 días; p<0.01) y mostraron una mayor capacidad para formar metástasis pulmonares por vía i.v. (B16: Md 7, rango 0 a 13 vs B16-mucina: 11, 2 a 23 nódulos/ratón; p<0.05). Por otra parte, se logró transfectar y sobreexpresar en B16 la secuencia murina de la CMP-NeuAc hidroxilasa (B16-hidroxilasa), enzima responsable de la síntesis de NeuGc. Las células B16-hidroxilasa mostraron una mayor proliferación y un aumento de la adhesión in vitro respecto de las B16 control (p<0.001). In vivo, la latencia tumoral de B16-hidroxilasa fue más corta (9.2 ± 0.5 días; p<0.05), de manera similar a lo observado en las células B16-mucina. Por el contrario, la capacidad metastásica de las células B16-hidroxilasa resultó dramáticamente disminuida (0, 0 a 2 nódulos/ratón; p<0.001). Se concluye que la presencia de residuos de NeuGc modificaría el comportamiento de este melanoma murino. Los resultados sugieren un efecto diferencial sobre la capacidad metastásica de las células B16 al sobreexpresar la enzima encargada de sintetizar NeuGc respecto de la incorporación exógena de este residuo a través de mucinas.