INVESTIGADORES
GIAMBARTOLOMEI Guillermo Hernan
congresos y reuniones científicas
Título:
La co-administración por vía oral con una proteína de Brucella spp. inhibe la degradación del antígeno en el sistema gastrointestinal
Autor/es:
IBAÑEZ, ANDRES; DELPINO, VICTORIA; CORIA, LORENA; BRUNO, LAURA; BARRIONUEVO, PAULA; GIAMBARTOLOMEI, GUILLERMO; CASSATARO JULIANA
Reunión:
Congreso; LIX Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2011
Resumen:
En nuestro laboratorio hemos demostrado que una proteína de membrana de Brucella spp. (Bp) al ser administrada por vía oral utilizando como antígeno (Ag) ovalbúmina (OVA) induce una respuesta de tipo T helper 1 OVA-específica sistémica y en mucosas. Uno de los principales problemas de la administración de Ags proteicos por vía oral es que existe degradación en el tracto gastrointestinal por proteasas y los Ags no llegan entonces a los sitios inductores de mucosas. En este trabajo y mediante análisis de homología de secuencias revelamos que la porción proteica de Bp posee homología significativa con inhibidores de proteasas bacterianos. Estos hallazgos nos han llevado a hipotetizar que la proteína podría inhibir in vivo la susceptibilidad del Ag a la degradación por proteasas presentes en la mucosa gastrointestinal y de esta manera incrementar la inmunogenicidad del Ag co-administrado. Por ello evaluamos si Bp es un inhibidor de proteasas y comprobamos in vitro que es capaz de inhibir parcialmente la actividad de proteasas presentes en estómago (pepsina) e intestino (tripsina, quimiotripsina, elastasa y carboxipeptidasa). OVADQ y caseína-BODIPY son proteínas que están “quencheadas” y emiten fluorescencia cuando se degradan. Observamos que Bp es capaz de inhibir en un 50% la degradación de Caseína-BODIPY y OVADQ al ser co-incubadas con lisados de estomago e intestino. También demostramos que Bp in vivo inhibe significativamente (p<0.05) la degradación del Ag co-adminstrado en ganglios mesentéricos (MLNs) como Placas de Peyer (PPs) a las 2 y 4 hs post-inmunización. Además, luego de la co-administración oral de Bp observamos por citometría de flujo un aumento (p<0.05) en la internalización del Ag (OVAFITC) en células dendríticas y monocitos de  PPs y MLNs Finalmente nuestros resultados en conjunto indican que Bp como adyuvante aumenta la vida media del Ag co-administrado por vía oral e incrementa la internalización por parte de células presentadoras de Ag profesionales.     
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