INVESTIGADORES
GIAMBARTOLOMEI Guillermo Hernan
congresos y reuniones científicas
Título:
La proteína de membrana de Brucella spp. como adyuvante aumenta la vida media del antígeno en los compartimentos endosomales
Autor/es:
CORIA LORENA; DELPINO VICTORIA; IBÁÑEZ ANDRÉS; BARRIONUEVO PAULA; GIAMBARTOLOMEI GUILLERMO; CASSATARO JULIANA
Reunión:
Congreso; LIX Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2011
Resumen:
Resultados previos de nuestro laboratorio demuestran que una proteína de membrana de Brucella spp. (Bp) como adyuvante de ovoalbúmina (OVA) aumenta la presentación cruzada del antígeno (Ag) estimulando respuestas inmunes T CD8+ y Th1. Por lo tanto, decidimos evaluar el efecto de Bp sobre las células presentadoras de Ags (APCs). Utilizando Ags fluorescentes (OVA-FITC, OVA-AlexaFluor 647) demostramos que Bp como adyuvante induce un aumento (P<0.05) en la internalización del Ag por parte de las APCs (macrófagos, células dendríticas-DCs- y linfocitos B) in vitro e in vivo. Es sabido que sin procesamiento antigénico no hay presentación a las células T e inducción de respuesta adaptativa, pero se ha demostrado que una limitada proteólisis lisosomal incrementa la inmunogenicidad de los Ags in vivo. Dado que análisis de homología de secuencias revelan que Bp posee homología con inhibidores de proteasas bacterianos decidimos estudiar si Bp es capaz de inhibir proteasas lisosomales de las APCs, y en consecuencia aumentar la vida media del Ag. Demostramos que efectivamente Bp es capaz de inhibir parcialmente la capacidad degradativa de proteasas lisosomales (catepsina D, L, C, B y S) e inhibe parcialmente (30%) la proteólisis de Ags eucariotas (OVA, BSA) y bacterianos (BLS, SurA, DNAK) por microsomas derivados de macrófagos y DCs murinas. También evaluamos la capacidad lítica de macrófagos y DCs en presencia de Bp como adyuvante utilizando como Ags OVADQ y caseína BODIPY (OVADQ y caseína BODIPY son proteínas que están “quencheadas” y emiten fluorescencia cuando se degradan). Observamos que Bp inhibe la degradación de Ags por parte de macrófagos y DCs in vitro e in vivo (P<0.05). Por lo tanto, Bp como adyuvante aumenta la captura del Ag coadministrado e inhibe parcialmente la actividad de proteasas lisosomales, disminuyendo la degradación del Ag por parte de la APC. Este incremento en la vida media del Ag podría prolongar su presentación por la APC aumentando su inmunogenicidad.
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