La apoptosis de astrocitos murinos inducida por B. abortus involucra sus lipoproteinas y es mediada por TNF-alpha

GARCÍA SAMARTINO C., K. A. PASQUEVICH, S. DIGENARO, P. BARRIONUEVO, A. ZWERDLING, J. CASSATARO, G. H. GIAMBARTOLOMEI.

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica de la SAI; 2007

Sociedad Argentina de Inmunología

La brucelosis es una zoonosis causada por bacterias del género Brucella. El síntoma característico de la neurobrucelosis es la inflamación en el sistema nervioso central originada por la invasión de Brucella. Dicha respuesta inflamatoria puede llevar a la astrogliosis induciendo apoptosis de los astrocitos. Resultados previos obtenidos en nuestro laboratorio indican que B. abortus es capaz de inducir la producción de citoquinas (TNF-alpha, IL-6 e IL-1beta) en astrocitos y que las lipoproteínas serían uno de los componentes responsables de estas respuestas. En este trabajo evaluamos la capacidad de B. abortus y sus componentes para inducir apoptosis en astrocitos. A partir de cerebro de ratones C57BL/6 se obtuvieron cultivos primarios de astrocitos. Estos se estimularon durante 24 h con B. abortus muerta por calor (HKBA), LPS de B. abortus (LPSb) y una lipoproteína modelo de B. abortus (Omp19), lipidada (L) y no lipidada (U). Como control se utilizaron TNF-alpha, un lipohexaé¦ptido sintético (Pam3cys) y paraformaldehído (PFA). La apoptosis fue evaluada por citometría de flujo y por microscopía de inmunofluorescencia mediante la técnica de AnexinaV/IP. HKBA indujo apoptosis en forma dosis dependiente, mientas que LPSb no produjo tal efecto. Tanto Omp19L como Pam3cys indujeron apoptosis, dado que Omp19U no lo hizo, la porción lipídica sería la responsable de la apoptosis. También determinamos el mecanismo involucrado en la apoptosis. Para ello, se obtuvieron cultivos primarios de astrocitos de ratones TNFR-/-. A diferencia de lo observado en los astrocitos de ratones C57BL/6, en las células de los ratones TNFR-/- no se observó apoptosis con ninguno de los tratamientos excepto con PFA. Estos resultados demuestran que B. abortus y sus lipoproteínas de son capaces de inducir apoptosis en astrocitos, que la porción lipídica de las lipoproteínas es la responsable y que el mecanismo que media dicha respuesta involucra al TNF-alpha.