Una estrategia bionanotecnológica para favorecer la neuroregeneración:células multipotentes transfectadas con nanocápsulas de PLGA y cargadas con nanopartículas de óxido de hierro.

DAVID DONALISIO; CLARA P. SETTON; MARCELA FERNANDEZ VAN RAAP

CABA

Congreso; Fronteras en Nanobiotecnología III, Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA; 2022

FFyB, UBA

Las neuropatías periféricas por compresión o trauma son eventos de alta frecuencia, comparables en prevalencia al accidente cerebrovascular y la enfermedad de Alzheimer. Nuestro grupo se aboca al desarrollo de nuevas estrategias para promover la regeneración morfológica y funcional de los nervios periféricos y en lograr una mejor comprensión de los procesos bioquímicos que ocurren durante este paso crítico. Como modelo de lesión periférica traumática, utilizamos la degeneraciónWalleriana reversible, promovida por compresión del nervio ciático, en ratas adultas. Como estrategia bionanotecnológicaproponemos el trasplante autólogo de células mononucleares de médula ósea (CMMO) transfectadas y asistido con direccionamiento magnético. Resultados previos demostraron que las CMMO trasplantadas sistémicamente migran espontáneamente hacia el sitio de la lesión y promueven su regeneración. [1] Enel mismo modelo demostramos que células mesenquimales de tejido adiposo cargadas con nanopartículas superparamagnéticas (NPM) de Fe3O4 recubiertas con ácido cítrico, son eficientemente direccionadas magnéticamente hacia el nervio lesionado optimizando el reclutamiento de células y aumentando su efecto neuroregenerativo.[2]El objetivo principal de este trabajo esel desarrollo de una nanoplataforma híbrida que incluya CMMO, NPMs y nanocápsulas poliméricas de ácido láctico glicólico (PLGA)funcionalizadas conpolietilenimina(PEI) y ARNm de los factores tróficos involucrados en el proceso de neuroregeneración (NGF, IGF-1, BDNF, GDNF o CNTF).En esta presentación discutiremos los avances obtenidos en las diversas etapas del desarrollo de la nanoplataforma híbrida.A tal fin, sintetizamos PLGA mediante la policondensación directa y lo caracterizamos con1H-NMR y FTIR.Utilizamos la doble emulsión evaporación para producir nanocápsulas de PLGA. Estandarizamos la etapa de encapsulación,mediante la incorporación de NPM y diversos fluorocromos (fluoresceína sódica, FITC y rodamina). Corroboramoslaencapsulación con microscopia de epifluorescencia y por su respuesta a un campo magnético.Las nanocápsulas fueron funcionalizadas con PEI y se adsorbióADN en su superficie.Se realizaron pruebas preliminares de transfección en las CMMOque fueron exitosas.De esta forma demostramos la factibilidad del desarrollo propuesto y prevemos que lananoplataforma una vez incorporado elARNm de los factores tróficos mencionados constituirá una herramienta útil para el estudio de los procesos involucrados en la regeneración de nervios periféricos, como para el desarrollo de estrategias experimentales con aproximaciones terapéuticas.[1] Usach et al. Transplantation, 101(7):1573-1586, 2017[2] Soto et al. Acta Biomater. 130: 234?247, 2021