Participación de cadherina neural en la interacción de las gametas humanas.

DEL POZO, MR; MARÍN BRIGGILER, CI; GONZALEZ-ECHEVERRÍA, MF; RAWE, V; ALVAREZ-SEDÓ, C; VAZQUEZ-LEVIN, MH

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XI Jornadas Anuales Sociedad Argentina de Biología; 2009

Sociedad Argentina de Biología

participación de CADHERINA NEURAL EN la interacción de las gametas HUMANAS  1Del Pozo MR, 1Marín-Briggiler CI, 2Gonzalez-Echeverría MF, 3Rawe V, 3Alvarez-Sedó C, Vazquez-Levin MH1. 1IBYME, CONICET-UBA, 2Fertilab, 3CEGYR, Buenos Aires, Argentina. Introducción: Estudios previos de nuestro laboratorio describieron la localización de la molécula de adhesión cadherina neural (cad-N) en la región acrosomal de espermatozoides humanos intactos y en el segmento ecuatorial de los reaccionados. Objetivos: Evaluar la participación de cad-N en la interacción del espermatozoide con la zona pellucida (ZP) y el oolema. Métodos: Se realizaron ensayos de hemizona y de penetración de ovocitos de hámster sin ZP, con gametas preincubadas con anticuerpos anti cad-N dirigidos contra diferentes dominios extracelulares de la proteína (clon GC-4, Sigma, dominio 1; H-63, Santa Cruz Biotech., dominios 3-4). Resultados y Discusión: La preincubación de los espermatozoides con los anticuerpos H-63 (10 y 100 mg/ml) o GC-4 (20 y 200 mg/ml) no afectó su capacidad de unirse a la ZP homóloga en el ensayo de hemizona (datos no mostrados). Contrastando, la preincubación de ambas gametas con los anticuerpos anti cad-N condujo a una disminución significativa (P<0,01) en el número de penetraciones por ovocito con respecto al control (% de inhibición para H-63 20 mg/ml: 57±12%, media±EEM, n=3 ensayos; GC-4 200 mg/ml: 51±11%, n=8 ensayos). La disminución fue similar cuando el ensayo se realizó preincubando sólo los ovocitos. Cad-N fue inmunodetectada en ovocitos humanos y de hámster. Los resultados sugieren que cad-N tendría un rol en la adhesión/fusión de las gametas, pero no participaría en la interacción espermatozoide-ZP. Como se publica en Biocell: participation of neural CADHERIN in human gamete interaction   1Del Pozo MR, 1Marín-Briggiler CI, 2Gonzalez-Echeverría MF, 3Rawe V, 3Alvarez-Sedó C, 1Vazquez-Levin MH. 1IBYME, CONICET-UBA, 2Fertilab, 3CEGYR, Bs. As., Argentina. Introduction: Previous studies from our laboratory have described the localization of the adhesion molecule neural cadherin (N-cad) in the acrosomal region of intact human spermatozoa and in the equatorial segment of reacted cells. Aims: To evaluate the participation of N-cad in sperm interaction with the zona pellucida (ZP) and the oolemma. Methods: The hemizona and ZP-free hamster oocyte sperm penetration assays were carried out, in which gametes were preincubated with anti N-cad antibodies directed towards different extracellular domains of the protein (clone GC-4, Sigma, domain 1; H-63, Santa Cruz Biotech., domain 3-4). Results and Discussion: Sperm preincubation with either H-63 (10 and 100 mg/ml) or GC-4 (20 and 200 mg/ml) did not affect their ability to bind to the homologous ZP in the hemizona assay (data not shown). Contrasting, preincubation of both gametes with anti N-cad antibodies led to a significant decrease (P<0.01) in the number of sperm penetrations per oocyte in comparison with controls (% inhibition for H-63 20 mg/ml: 57±12%, mean±SEM, n=3 assays; GC-4 200 mg/ml: 51±11%, n=8 assays). A similar effect was found when only oocytes were preincubated with the antibodies. N-cad was immunodetected in human and hamster oocytes. The results suggest that N-cad has a role in gamete adhesion/fusion but would not participate in sperm-ZP interaction.