Participación de cadherina epitelial en la interacción de gametas en el modelo bovino.

CABALLERO, J.N.; DALVIT, G.C.; CÉTICA, P.D.; VAZQUEZ-LEVIN, M.H.

Facultad de Ciencias Veterinarias de la UBA

Congreso; Primeras Jornadas Internacionales del Instituto de Investigación en Reproducción Animal.; 2008

INITRA

Las interacciones moleculares asociadas al proceso de la fecundación de mamíferos involucran eventos de adhesión célula-célula, entre ellos la interacción de los espermatozoides con las células del cumulus oophorus y con el ovocito. La Cadherina epitelial (CadE) es una molécula de adhesión celular dependiente de iones calcio, de unión homotípica (cadE-cadE) a través de los dominios extracelulares; su función está regulada por el anclaje al citoesqueleto de actina a través de β-catenina (β-cat). HIPOTESIS: CadE está presente en ambas gametas y participa en fenómenos de adhesión celular durante la fecundación. OBJETIVOS: Evaluar a) la presencia y localización de CadE en espermatozoides en los diferentes estadios de la fecundación y en los complejos ovocito-cumlulus (COCs) madurados in vitro, b) la participación de CadE en los eventos de interacción de las gametas. RESULTADOS: CadE fue localizada: 1) en el reborde apical del acrosoma en espermatozoides con acrosomas intactos no capacitados y capacitados y 2) en la membrana acrosomal interna y en el segmento ecuatorial de espermatozoides reaccionados. CadE fue inmunodetectada en las células del cumulus, en sus proyecciones hacia el ovocito y en el oolema. La preincubación de espermatozoides capacitados con anticuerpos dirigidos contra los dominios extracelulares de CadE inhibió significativamente (p<0,05) la capacidad de fecundar in vitro los ovocitos, utilizando tanto COCs (control: 90 ± 1, n=119 vs. anti CadE: 69 ± 5, n= 151; promedio ± SEM) como ovocitos maduros denudados (control: 89 ± 4, n= 98 vs. anti CadE: 57 ± 7, n= 122). La preincubación de espermatozoides capacitados con el anticuerpo anti CadE condujo a una disminución significativa (p<0,05) del número de espermatozoides unidos a la zona pellucida (ZP) de ovocitos maduros denudados (inhibición: 49%, n=35). Asimismo, la preincubación con el anticuerpo anti CadE de espermatozoides tratados con lisofosfatidilcolina produjo una reducción significativa (p<0,05) en el número de espermatozoides unidos al oolema en ensayos de “binding” a ovocitos maduros sin ZP (inhibición: 79%; n=50). CONCLUSIÓN: CadE se expresa en ambas gametas bovinas y participaría en los eventos de adhesión entre los espermatozoides capacitados y las células del cumulus y la ZP, y entre espermatozoides reaccionados y el oolema de ovocitos maduros.