Evidencias de la secreción de “Glucose-related protein 78” (GRP78) por el oviducto humano y su participación en la interacción de gametas.

MARÍN-BRIGGILER, C.I.; GONZÁLEZ-ECHEVERRÍA, M.F.; MUNUCE, M.J.; GHERSEVICH, S.; CAILLE, A.M.; CORRIGALL, V.M.; VAZQUEZ-LEVIN, M.H.

Instituto de Biología y Medicina Experimental

Congreso; X Jornadas de la Sociedad Argentina de Biología; 2008

Instituto de Biología y Medicina Experimental

Introducción: Grp78 es una chaperona descripta en la superficie celular y en el espacio extracelular; sin embargo, no existen evidencias sobre su presencia y función en el tracto reproductor femenino. Objetivos: Determinar la expresión y secreción de Grp78 por cél. epiteliales del oviducto (CEO) humano, así como su participación en la interacción de gametas. Métodos: La expresión y secreción de Grp78 por el oviducto humano fue analizado por inmunohistoquímica y Western immunoblotting, respectivamente. El efecto de Grp78 recombinante (rec-Grp78) sobre la interacción de espermatozoide-zona pellucida (ZP) fue determinada usando el ensayo de hemizona (HZA). Resultados y Discusión: Grp78 fue localizada en la superficie de CEO; Grp78 soluble fue detectada en fluidos oviductales de mujeres en período periovulatorio y en medio condicionado de tejido oviductal, indicando su secreción in vivo e in vitro. La presencia de rec-Grp78 durante el HZA condujo a una disminución en el número de espermatozoides unidos a la ZP. Cuando los iones calcio del medio de incubación fueron reemplazados por estroncio, rec-Grp78 favoreció la interacción espermatozoide-ZP, sugiriendo que Grp78 modula la interacción de gametas de manera dependiente de calcio.   Versión en Inglés como será publicada en Biocell EVIDENCE ON THE SECRETION OF Glucose-regulated protein 78 (Grp78) by the human oviduct and ITS INVOLVEMENT IN GAMETE interaction.   Marín-Briggiler CI1, González-Echeverría MF2, Munuce MJ3, Ghersevich S3, Caille AM3, Corrigall VM4, Vazquez-Levin MH1. 1IBYME, CONICET-UBA; 2Fertilab, Bs. As.; 3Lab. de Est. Reproductivos, Fac. Cs. Bioq. y Farm., Univ. Nac. de Rosario, Argentina; 4King’s College London, London, United Kingdom.   Introduction: Grp78 is a chaperone found in the cellular surface and in the extracellular space; however its presence and function in the female reproductive tract remain unknown. Objectives: To determine the expression and secretion of Grp78 by human oviduct epithelial cells, as well as its participation in gamete interaction. Methods: Grp78 expression and secretion by the human oviduct was analyzed by immunohistochemistry and Western immunoblotting, respectively. The effect of recombinant Grp78 (rec-Grp78) upon sperm-zona pellucida (ZP) interaction was determined using the hemizona assay (HZA). Results and Discussion: Grp78 was found in the surface of oviduct epithelial cells; soluble Grp78 was detected in oviductal fluids from women in the periovulatory period and in oviductal tissue conditioned medium, indicating its secretion both in vivo and in vitro. Presence of rec-Grp78 in the HZA led to a decrease in the number of spermatozoa bound to the ZP. When calcium ions from the incubation medium were replaced by strontium, sperm-ZP interaction was enhanced by rec-Grp78, suggesting that Grp78 modulates gamete interaction in a calcium-dependent manner.