Inmunolocalización de caderina N en espermatozoides humanos y evaluación de su participación en el proceso de fecundación.

MARIN BRIGGILER, VAZQUEZ-LEVIN Y COL (VER DETALLE EN RESUMEN)

Mar del Plata, Argentina

Congreso; I Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

Sociedad Argentina de Investigacion CLinica

Inmunolocalización de caderina N en espermatozoides humanos y evaluación de su participación en el proceso de fecundación Clara (1) Marín-Briggiler; Ezequiel (1) Lentz; Florencia (1) Veiga; Fernanda (2) Gonzalez-Echeverría; Mónica (1) Vazquez-Levin. (1) IBYME CONICET-UBA. (2) Fertilab. Bs As Argentina.   Las caderinas son glicoproteínas de membrana que intervienen en la adhesión celular. Evidencias preliminares sugieren la presencia de caderina N (cad-N) en la superficie de espermatozoides (Rufas et al, 2000) y la existencia de transcriptos espermáticos (Goodwin et al, 2000). El objetivo del trabajo fue determinar la presencia y localización de cad-N en espermatozoides humanos y evaluar su participación en el proceso de fecundación. En los estudios se utilizó un anticuerpo policlonal anti cad-N (Santa Cruz Biotech.). En ensayos de “Western immunoblotting” de proteínas espermáticas se detectó una forma mayoritaria de 113 KDa, resistente al tratamiento de los espermatozoides con un buffer con NaCl 1 M. Esta forma también fue detectada en extractos proteicos de testículo y en plasma seminal. Cad-N fue inmunolocalizada predominantemente en el segmento ecuatorial y en la región acrosomal de espermatozoides del eyaculado (62±7 %, media+EEM; 17±10 %) y capacitados por 18 h (51±8 %; 30±8 %) (n=5). En espermatozoides reaccionados, cad-N fue detectada principalmente en el segmento ecuatorial (84±2 % de las células) (n=3). Todos los espermatozoides mostraron tinción específica para cad-N en el flagelo. La preincubación de los espermatozoides con anti cad-N (100 mg/ml) no afectó su unión a la zona pellucida (ZP) homóloga (anti cad-N= 29±11 vs Control=33±12 espermatozoides unidos/hemizona) (n=6). Contrastando, estudios preliminares revelaron que la preincubación de ovocitos de hamster sin ZP con anti cad-N (20 mg/ml) condujo a una disminución en el % de ovocitos penetrados por los espermatozoides humanos (anti cad-N=40 % vs Control=100 %) (n=2). Los estudios describen la presencia y localización de cad-N en espermatozoides humanos del eyaculado, capacitados y reaccionados, y sugieren su participación en la adhesión/fusión del espermatozoide a la membrana plasmática del ovocito.