Inmunodetección de la proteína de adhesión caderina E en gametas bovinas.

CABALLERO , VAZQUEZ-LEVIN Y COL (VER DETALLE EN RESUMEN)

Mar del Plata, Argentina

Congreso; I Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

Inmunodetección de la proteína de adhesión Caderina E en gametas bovinas Julieta (1) Caballero; Clara (1) Marín-Briggiler; Mariano (1) Lattanzi; Lino (1) Barañao; Pablo (2) Cetica; Gabriel (2) Dalvit; Mónica (1) Vazquez-Levin. IBYME, CONICET-UBA (2) Fac Cs Vet UBA. Bs As Argentina   La caderina epitelial (cad-E) es una glicoproteína de adhesión que participa en la unión intercelular en forma dependiente de iones calcio. Estudios de nuestro grupo sugieren su participación en la interacción de gametas en el hombre y el ratón. El objetivo del estudio fue determinar la presencia y localización de cad-E en ovocitos y espermatozoides bovinos. Se realizaron ensayos de inmunocitoquímica en ovocitos de ovarios de vacas faenadas y espermatozoides previamente congelados de 5 toros del centro de inseminación artificial CIAVT. Para ello se usó un anticuerpo anti cad-E dirigido contra el dominio extracelular caderina 5 (Santa Cruz Biotech). Además se evaluó la motilidad y morfología espermáticas y el estado de capacitación/reacción acrosomal (técnica de CloroTetraCiclina; CTC). Los ensayos sobre ovocitos madurados in vitro revelaron la presencia de una señal específica para cad-E en la zona pellucida y membrana plasmática ovocitaria. Se obtuvieron resultados similares con ovocitos fijados antes o después de la incubación con anti cad-E. Los muestras de espermatozoides presentaron porcentajes de células mótiles post-lavado y morfología espermática dentro de los valores esperados (66±11% células mótiles progresivas; 86±6% formas normales; media±DEM). Los ensayos de CTC de espermatozoides lavados en medio TALP completo revelaron la presencia de 50% de células capacitadas. Estudios de inmunocitoquímica sobre espermatozoides fijados y permeabilizados mostraron una señal muy intensa de cad-E en el borde apical del acrosoma en un alto % de las células (74+6; rango 68-81). Esta localización se acompañó con una señal fuerte y uniforme en el resto de la cabeza o sólo en la región postacrosomal. En conclusión, Cad-E se encuentra presente en ovocitos y espermatozoides bovinos, en regiones que participan en la interacción de las gametas. Estudios futuros evaluarán su rol en la fecundación.