Expresión de cadherina E en espermatozoides de ratón.

VEIGA, VAZQUEZ-LEVIN Y COL (VER DETALLES EN RESUMEN)

Mar del Plata, Argentina

Congreso; I Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas.; 2004

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

Expresión de cadherina E en espermatozoides de ratón Florencia (1) Veiga; Ezequiel (1) Lentz; Cintia (1) Rivero; Amanda (2) Vincenti; Miguel (2) Fornés; Mónica (1) Vazquez-Levin. (1)IBYME  CONICET-UBA Bs A; (2)IHEM, Mendoza. Argentina   Durante el tránsito por el epidídimo, el espermatozoide adquiere la capacidad de interactuar con el ovocito; el epidídimo aporta los factores que le confieren dicha capacidad. La caderina epitelial (cad-E) es una molécula de adhesión celular cuya expresión en el epidídimo ha sido descripta en rata y humano. Estudios recientes de nuestro grupo sugieren la participación de la cad-E en la interacción de gametas de ratón. El objetivo del estudio fue determinar la expresión de cad-E en epidídimo de ratón y evaluar su localización en espermatozoides epididimarios y testiculares. Se realizaron ensayos de “Western immunoblotting” y RT-PCR de epidídimo, e inmunocitoquímica de espermatozoides de caput, corpus y cauda epididimarios y testiculares. Además, se hicieron estudios de microscopía electrónica de transmisión (MET) de espermatozoides del cauda. La inmunodetección de cad-E se hizo con un anticuerpo policlonal específico dirigido contra el dominio extracelular caderina 5 (Santa Cruz Biotech). En Western immunoblotting de proteínas epididimarias se identificó una forma de cad-E de 127 KDa, detectada también en extractos de espermatozoides del cauda. Ensayos de RT-PCR confirmaron la presencia de transcriptos de cad-E epididimarios.   En inmunocitoquímica, la mayoría de los espermatozoides testiculares presentaron una señal para cad-E tenue en toda la célula. Contrastando, los espermatozoides del caput, corpus y cauda epididimarios presentaron una señal fuerte en la región acrosomal y postacrosomal en un % variado de células (caput=2-78%, corpus=50-84%, cauda=5-58%; n=3). Los estudios de MET permitieron localizar cad-E en la membrana plasmática de la cabeza del espermatozoide. Los estudios confirman la expresión de cad-E en epidídimo de ratón y muestran variaciones en el % y localización de la proteína en los espermatozoides del ducto. Los estudios de MET revelan la localización de cad-E en la membrana plasmática del espermatozoide.       Florencia (1) Veiga; Ezequiel (1) Lentz; Cintia (1) Rivero; Amanda (2) Vincenti; Miguel (2) Fornés; Mónica (1) Vazquez-Levin. (1)IBYME  CONICET-UBA Bs A; (2)IHEM, Mendoza. Argentina   Durante el tránsito por el epidídimo, el espermatozoide adquiere la capacidad de interactuar con el ovocito; el epidídimo aporta los factores que le confieren dicha capacidad. La caderina epitelial (cad-E) es una molécula de adhesión celular cuya expresión en el epidídimo ha sido descripta en rata y humano. Estudios recientes de nuestro grupo sugieren la participación de la cad-E en la interacción de gametas de ratón. El objetivo del estudio fue determinar la expresión de cad-E en epidídimo de ratón y evaluar su localización en espermatozoides epididimarios y testiculares. Se realizaron ensayos de “Western immunoblotting” y RT-PCR de epidídimo, e inmunocitoquímica de espermatozoides de caput, corpus y cauda epididimarios y testiculares. Además, se hicieron estudios de microscopía electrónica de transmisión (MET) de espermatozoides del cauda. La inmunodetección de cad-E se hizo con un anticuerpo policlonal específico dirigido contra el dominio extracelular caderina 5 (Santa Cruz Biotech). En Western immunoblotting de proteínas epididimarias se identificó una forma de cad-E de 127 KDa, detectada también en extractos de espermatozoides del cauda. Ensayos de RT-PCR confirmaron la presencia de transcriptos de cad-E epididimarios.   En inmunocitoquímica, la mayoría de los espermatozoides testiculares presentaron una señal para cad-E tenue en toda la célula. Contrastando, los espermatozoides del caput, corpus y cauda epididimarios presentaron una señal fuerte en la región acrosomal y postacrosomal en un % variado de células (caput=2-78%, corpus=50-84%, cauda=5-58%; n=3). Los estudios de MET permitieron localizar cad-E en la membrana plasmática de la cabeza del espermatozoide. Los estudios confirman la expresión de cad-E en epidídimo de ratón y muestran variaciones en el % y localización de la proteína en los espermatozoides del ducto. Los estudios de MET revelan la localización de cad-E en la membrana plasmática del espermatozoide.