Anticuerpos contra la proteasa espermática acrosina. I. Modelo de inmunidad natural para el estudio de su rol en fecundación

VAZQUEZ-LEVIN MH Y COL

Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA

Conferencia; II Jornadas Inmunología de la reproducción; 2004

Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA

Anticuerpos contra la proteasa espermática acrosina. I. Modelo de inmunidad natural para el estudio de su rol en fecundación. 1Veaute C, 1Furlong LI, 2Bronson R, 3Liu Y, 1Vazquez-Levin MH. 1IBYME CONICET-UBA, Bs As Argentina; 2Univ. Stony Brook, Nueva York EEUU; 3Univ. Melbourne, Carlton Australia Acrosina es una proteasa de tipo tripsina almacenada como zimógeno (proacrosina) en el acrosoma del espermatozoide. Estudios en animales sugieren su participación durante la fecundación, en la unión y digestión de la matriz que rodea al ovocito, la zona pellucida (ZP), y en la liberación de los componentes del acrosoma durante la reacción acrosomal. En este estudio se evaluó la incidencia de anticuerpos antiacrosina en mujeres en consulta por infertilidad y su impacto sobre las funciones del sistema proacrosina/acrosina. Se desarrolló un ELISA con proacrosina recombinante (Rec-40) como antígeno (ELISA-Acro). La evaluación de 179 sueros reveló una incidencia del 19% de sueros con anticuerpos antiacrosina. El análisis de los sueros mediante el ensayo de “Immunobeads” (IB) arrojó una incidencia de anticuerpos antiespermáticos del 20%. Sólo 6 sueros antiacrosina positivos fueron IB positivos, indicando que el ensayo de IB no permite predecir la presencia de anticuerpos antiacrosina. El ELISA-Acro sobre Rec-40 y productos N-terminal de la expresión de proacrosina en bacteria permitió identificar 9 sueros que sólo reconocieron la región C-terminal (aa-300-402) de proacrosina. Esta región está involucrada en el mecanismo de activación de la proenzima, y en su interacción con componentes de la ZP. Los 9 sueros inhibieron la unión de Rec-40 a la proteína de ZP, ZPA; además, 3 de ellos inhibieron la activación de proacrosina. El anticuerpo monoclonal antiacrosina AcrC5F10 (dirigido contra aa 305-309 de proacrosina) también afectó las funciones del sistema proacrosina/acrosina. La presencia de AcrC5F10 en ensayos de interacción condujo a una disminución del porcentaje de espermatozoides reaccionados sobre la ZP (36±15 vs 55±15 % esp. reaccionados en la ZP; P< 0,05; n= 7). Los resultados muestran que el sistema proacrosina/acrosina puede desencadenar una respuesta inmune en el hombre. Los anticuerpos antiacrosina afectaron sus funciones y alteraron el proceso de reacción acrosomal. La evaluación de anticuerpos antiacrosina podría contribuir al diagnóstico de la infertilidad.