Heparán sulfato y su papel en el reconocimiento espermatozoide-oviducto en humanos.

JUAREZ YR; GALOTTO C; GIL S; JULIANELLI V; GOGORZA S; PIÑEIRO DE CALVO L; CALVO JC; ROMANATO M

Congreso; LX Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2015

Describimos previamente que el heparán sulfato (HS) esfundamental en la descondensación cromatínica espermáticadurante la fecundación y que se encuentra en el ooplasma yespacio perivitelino de los oocitos. Objetivo: Estudiar la presenciade HS en el espermatozoide lavado, capacitado y reaccionado ysu posible rol en la interacción con células oviductales en cultivo.El protocolo y los Consentimientos Informados han sido aprobadospor los Comités de Ética del HIBA y del IBYME. Metodología: Losespermatozoides se obtuvieron de individuos normozoospérmicos(OMS) y se procesaron para obtener la fracción mótil por swim-up.Se capacitaron y se indujo la reacción acrosomal con ionóforo decalcio. La presencia de HS se analizó por citometría de flujo, conanticuerpo anti-HS y segundo anticuerpo marcado con FITC. Lasmuestras de oviducto se obtuvieron de pacientes premenopáusicas,sin infecciones o enfermedades neoplásicas, por laparoscopíaohisterectomíayseprocesarondentrodelas2h.Luegodeseparareltejidoconectivo,secortaronlongitudinalmenteparaexponer el interior y, por raspado, obtener las células. Para la interacción, se preincubaron las células confluentes con heparina46 µM o medio y, luego de lavar, se agregaron los espermatozoides.Sefijaronlascélulasconglutaraldehído,fotografiaron20camposy contaron los espermatozoides unidos. Resultados: ElHSpermanece unido al espermatozoide, incluso aumenta luegodelareacciónacrosomal (lavados vs capacitados,NS; lavados vsreaccionados,p