El endosulfan afecta la descondensación de la cromatina del núcleo espermático de ratón.

SANCHEZ MELISA; LO NOSTRO F; ROMANATO M; JULILANELLI VL; CALVO L; CALVO JC; FONTANA VA

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2013

SAIC

La descondensación de la cromatina espermática es requisito para la singamia y requiere la tiorreducción de disulfuros de protaminas asociadas al ADN y el intercambio con histonasovocitarias. Pesticidas como el endosulfán podrían alterar este proceso. Objetivos: Evaluar en sistema murino el efecto del endosulfán sobre la descondensación de la cromatina espermática.Metodología: Se obtuvieron espermatozoides epididimarios de ratones CF-1, y se incubaron con concentraciones crecientes de endosulfán puro o formulado (100 pM a 100 μM), usando medio o DMSO como controles. Para evaluar la descondensación, se incubaron 1-2 x106 espermatozoides con Heparina y GSH durante distintos tiempos a 37 °C en 5% CO2. Se fijaron con glutaraldehído al 2% y se determinó en microscopio con contraste de fase el porcentaje de espermatozoides descondensados. Se analizó el estado redox de las protaminas asociadas alDNA espermático incubando con endosulfán (100 μM) y medio o DMSO utilizando elreactivo monobromobimane (mBBr), observando con microscopio de fluorescencia y analizando con el programa Image J. Los experimentos se realizaron por duplicado evaluando 200 célulasen cada muestra. Resultados y conclusiones: El endosulfán puro produce un aumento significativo de la descondensación cuando los espermatozoides se incuban con una concentración de 1μM y 100 μM (p<0.05 y p<0.001 respectivamente versus GSH + Heparina). Al utilizar endosulfán comercial solo se ve diferencia con la concentración más alta (100 μM) (p<0.001). Al evaluar el efecto de este pesticida sobre el estado redox de las protaminas no se obtuvieron diferencias significativas entre los controles y los tratamientos. Los resultados obtenidos descondensando in vitro espermatozoides previamente incubados con endosulfán,manifiestan que este modelo podría utilizarse como centinela para evaluar posibles efectos de tóxicos ambientales.