INVESTIGADORES
CALVO Juan Carlos
congresos y reuniones científicas
Título:
La vía alternativa de AMPc/EPAC y la vía de MAPK median la estimulación de leptina por hCG en placenta.
Autor/es:
MAYMÓ JL; PÉREZ-PÉREZ A; MASKIN B; CALVO JC; SANCHEZ-MARGALET V; VARONE CL
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La leptina (LEP) ha sido propuesta como una molécula fundamental
en la regulación de la implantación y en el mantenimiento
del
embrión. Es una hormona de 16kDa descubierta en tejido
adiposo
con
la
función
de
regular
el
balance
energético
del
organismo.
También es expresada en placenta humana donde podría
tener
efectos sobre el crecimiento, la angiogénesis y la inmunomodulación.
Hemos
demostrado
que
el
AMPc
y
la
hCG
inducen
la
expresión
de leptina
en células
placentarias.
En
el presente
trabajo,
analizamos las vías de señalización y los mecanismos
involucrados
en la estimulación de leptina por hCG en trofoblastos
humanos.
Utilizamos
como
modelo
de trabajo
las
líneas celulares
trofoblásticas
BeWo y JEG-3 así como explantos de placenta humana
término. Por qRT-PCR confirmamos que el hCG (25-100 UI/
ml)
estimula
la
expresión
de
leptina
en
trofoblastos.
Determinamos
también
que la hCG aumenta los niveles de AMPc y activa la
transcripción
a
través
de
elementos
CRE,
evaluado
por
ensayos
de
gen
reportero
con
plásmidos
conteniendo
el
elemento
CRE
y
el gen luc. Por qRT-PCR y por WB observamos que el AMPc
inhibe
el efecto estimulatorio de hCG sobre leptina. Previamente,
demostramos
que la estimulación de leptina por hCG en placenta
era
ejercida
a
través
de
la
vía
de
la
MAPK.
Por
WB
y
ensayos
de
gen
reportero
con
plásmidos
conteniendo
el
promotor
de
leptina
y
el
gen luc, determinamos que la inhibición de la PKA con H89 10
µM
no
bloquea
la
estimulación
de
leptina
por
hCG.
Más
aún,
la
inhibición
de PKA indujo significativamente la fosforilación de ERK
1/2,
medida por WB. Finalmente, el tratamiento con un análogo del AMPc (8cpt-2me-cAMP, 10µM) que estimula la vía de Epac (sin estimular a la PKA), o la cotransfección con intermediarios de dicha vía, estimularon tanto la expresión basal de leptina como la inducida por hCG. En resumen, demostramos que la estimulación
de
leptina
por
hCG
en
placenta
es
independiente
de
PKA
e
involucra la vía de MAPK y la vía alternativa de AMPc/Epac.