INVESTIGADORES
CALVO Juan Carlos
congresos y reuniones científicas
Título:
Evidencias de sinergismo en la descondensación de la cromatina de espermatozoides murinos: efecto del dermatán sulfato y la heparina
Autor/es:
SANCHEZ MELISA; FONTANA VA; ROMANATO M; JULIANELLI VL; CALVO L; CALVO JC
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
Introducción. La descondensación cromatínica es fundamental para formar el pronúcleo masculino y permitir singamia. Requiere tiorreducción de disulfuros en protaminas e intercambio con histonas
ovocitarias que, en espermatozoides humanos dependería
de
heparán
sulfato.
En
espermatozoides
murinos
encontramos
que
dermatán sulfato (DS) también descondensa la cromatina.
Las
diferencias observadas entre ambas especies podrían indicar
una
condensación diferencial de la cromatina. Objetivos. Estudiar
la
descondensación en espermatozoides murinos, utilizando DS,
comparando
con
heparina
y
evaluar
diferencias
en
el
grado
de
condensación.
Metodología Los animales se sacrificarán y, en forma
aséptica se obtendrán los espermatozoides epididimarios, que
serán
descondensados con Heparina/DS y GSH durante distintos
tiempos
a 37 °C. Se fijarán con glutaraldehído 2% en PBS y se determinará el porcentaje descondensación en contraste de fases, clasificando según refringencia, aspecto granuloso y tamaño del núcleo: sin cambios (S), moderadamente descondensados (M), o groseramente descondensados (G). El porcentaje de descondensación
será la suma
(M+G),
por
duplicado
y
evaluando
al menos
200
células
en
cada
muestra.
Resultados
y conclusiones.
DS
induce
una
descondensación
similar
al
de
heparina,
con
cinética
para
ambos glicosaminoglicanos semejante (t0.5 = 43.55 + 2.19
min
para Heparina y 35.45 + 2.17 min para DS). Sin embargo,
combinando
ambos,
se observa
efecto
sinérgico con
disminución
del
t0.5 a 17.96 + 1.2 min, correspondiendo a un incremento en
descondensación
de
3
veces
por
sobre
la
suma
de
los
efectos
individuales,
indicando
una
interacción
diferente
de
cada
GAG con
la
cromatina,
posiblemente debido a las
características químicas
de
las moléculas, como también un probable grado de compactación
diferente
de
la
cromatina.
Esta
compactación
diferencial
podría
incidir en fertilización asistida, cuando observamos fallas
en
la
descondensación.
