Variabilidad de cepas de Alternaria alternata ailadas de trigo

RAMIREZ, M.L; OVIEDO, M.S; CHULZE, S.N

Actualidades em Micotoxinas e Armazenagem de Graos II

Imprenta Universitaria

Lugar: Florianopolis; Año: 2008; p. 273 - 279

La producción de trigo en Argentina alcanza aproximadamente 16 millones de toneladas, ocupando nuestro país el quinto lugar como exportador a nivel mundial. La presencia de hongos en trigo previo a la cosecha incluyendo especies de Alternaria, Aspergillus y Fusarium, causan problemas en la industria molinera, con menor calidad de la harina panificable. Estudios previos han demostrado una alta incidencia de especies de Alternaria en grano de trigo cultivado en Argentina. En un estudio llevado a cabo en nuestro laboratorio donde se han identificado a nivel de especies las cepas de Alternaria presentes en trigo han demostrado que la especies predominante es A. alternata y en menor número A. infectoria. El objetivo del presente trabajo fue poner a punto la técnica de marcadores moleculares neutros AFLPs (amplified fragment lenght polymorphism) para determinar variabilidad genética entre cepas de Alternaria alternata aisladas de trigo. Para la producción de biomasa fúngica se probaron dos medios de cultivo diferentes (caldo glucosa-asparagina y caldo Wikerman). El ADN fue extraído utilizando CTAB. Se generaron los marcadores de AFLP siguiendo la metodología propuesta por Leslie y Summerell (2006). Se utilizaron 5 combinaciones de cebadores (EcoRI y MseI) a fin de determinar cuales eran los más adecuados, usando como criterio el número de bandas generadas por cada uno de ellos. Los mejores resultados se obtuvieron cuando los cebadores utilizados fueron EcoRI + TG y MseI + G, y EcoRI + TT y MseI + G, donde la lectura de los geles entre 200 y 400 pares de base (pb), reveló la presencia de un promedio de 50 y 60 bandas respectivamente. En todos los casos se observaron bandas polimórficas. Si bien siempre utilizamos el cebador EcoRI con 2 nucleótidos (EcoRI + TG y EcoRI + TT), el cebador MseI fue probado con 1 nucleótido y 2 nucleótidos adicionales. Los mejores resultados fueron con MseI + 1 nucleótido, tomando siempre como criterio el número de bandas generadas. De acuerdo a los resultados obtenidos el genoma de A. alternata no es muy complejo, y posee un alto contenido de adenina (A) y citosina (C).