Efecto de la inducción de HO-1 sobre el receptor de glucocorticoides en cáncer de próstata

LEONARDI DAIANA; PAEZ ALEJANDRA; SCHUSTER FEDERICO; GUERON GERALDINE; COTIGNOLA JAVIER; VAZQUEZ ELBA

Mar del Plara

Congreso; SAIC 2014 Reunion Anual; 2014

SAIC

Los glucocorticoides se administran en combinación con otras drogas para el tratamiento del cáncer de próstata refractario a hormonas, aunque su uso es discutido porque actualmente se acepta que el receptor de glucocorticoides (GR) puede sustituir al receptor de andrógenos y activar un set similar pero distinguible de genes. Nuestro objetivo es estudiar la señalización del GR y el efecto de hemo oxigenasa 1 (HO-1) en esta vía. Para estudiar la actividad trasncripcional de GR utilizamos un ensayo de genes reporteros en células de la línea PC3 (insensible a hormonas) transfectadas con el plásmido MMTV-luc, que posee 3 sitios de unión para GR río arriba del gen de la luciferasa. Se realizaron tratamientos con dexametasona (Dex 10-8 M, 6h), con un inductor de HO-1 (hemina 80µM, 24h), o con ambas drogas. Las células fueron cultivadas en medio con suero sin hormonas. El tratamiento con hemina redujo significativamente la actividad basal del GR (p=0,03) como la inducida por Dex (p=0,01). Estos resultados se confirmaron por RT-qPCR de un gen blanco directo de GR (IkB) y mediante el uso de un plásmido reportero con sitios para NFkB. Utilizando microscopía confocal, se corroboró la translocación nuclear de GR por efecto de Dex, y se demostró una menor translocación cuando las células se expusieron al tratamiento combinado con hemina y Dex. Este fenómeno se condice con la disminución de la actividad del reportero detectada usando el MMTV-luc en presencia de hemina+Dex vs Dex. También demostramos interacción física entre GR y HO-1 en núcleo y citoplasma por co-inmunoprecipitación. En conclusión, estos resultados sugieren que la inducción de HO-1 modula la actividad del GR y su localización celular en las células PC3.