PERFIL PROTEÓMICO DE LOS INTERACTORES DE HO-1 EN CÁNCER DE PRÓSTATA

GUERON G; VALACCO P; ELGUERO B; COLUCCIO LESKOW F; PAEZ A; DE SIERVI A; VAZQUEZ E

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2012

SAIC

La etiología del cáncer de próstata (PCa) no es clara, dificultando la prevención temparana. El antígeno prostático específico (PSA) se utiliza como el marcador de detección, sin embargo tiene baja especificidad. Surge la necesidad de encontrar otros marcadores tumorales prostáticos más específicos. La hemo-oxigenasa 1 (HO-1) ejerce funciones anti-oxidantes y anti-inflamatorias. Previamente documentamos su expresión nuclear en carcinomas prostáticos humanos. En líneas celulares de PCa la sobre-expresión de HO-1 indujo su localización nuclear e inhibió la proliferación, migración e invasión y el crecimiento tumoral in vivo. Análisis de ChIP demostraron que HO-1 se asocia a promotores de genes relevantes en PCa como PSA. Nuestra hipótesis se basa en que HO-1 en el núcleo podría actuar como un co-regulador de la transcripción favoreciendo un fenotipo menos agresivo. Por tal motivo es importante encontrar los interactores moleculares de HO-1. Para abordar este objetivo empleamos técnicas de proteómica utilizando la proteína recombinante HO-GST expresándola en células PC3. Se purificaron los complejos que co-eluyeron con HO-1 y se corrieron en un gel de poliacrilamida. Las bandas proteicas fueron digeridas con tripsina. Los péptidos se analizaron por MALDI-TOF/TOF (Ultraflex II). Con los espectros obtenidos se generaron lista de picos (Software Flex Analysis) y se realizaron búsquedas con el Mascot, (tolerancia de 200 ppm),  utilizando carbamidometilación, acetilacón del extremo N-terminal y oxidación, como modificaciones fijas. Se compararon los hits significativos obtenidos para las células identificándose a la proteína muskelina, como candidata a ser interactora de HO-1. Se realizarán estudios de pull-down, para verificar esta interacción y construir el interactoma de HO-1, permitiendo detectar la expresión de proteínas no reportadas aún en células tumorales prostáticas y que pueden surgir como blancos terapéuticos nóveles o factores pronóstico para el PCa.