INVESTIGADORES
VAZQUEZ Elba Susana
congresos y reuniones científicas
Título:
BRCA1 aumenta la resistencia al tratamiento con Doxorubicina en células tumorales de cáncer de próstata en un mecanismo mediado por GADD153
Autor/es:
DE LUCA P; ZALAZAR F; MOIOLA C; COTIGNOLA J; GUERON G; GARDNER K; VAZQUEZ E; DE SIERVI A
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XXVI JORNADAS NACIONALES DE ONCOLOGIA DEL INSTITUTO “ÁNGEL H. ROFFO”; 2010
Institución organizadora:
INSTITUTO “ÁNGEL H. ROFFO”
Resumen:
El gen de la susceptibilidad del cáncer de mama (BRCA1) es un gen supresor de tumores y mutaciones en este gen confieren un riesgo alto para varios tipos de canceres que responden a hormonas, incluyendo el cáncer de próstata. BRCA1 regula la respuesta al daño en el ADN, la progresión del ciclo celular, la apoptosis, la respuesta a hormonas esteroideas y el mantenimiento de la integridad genómica; sin embargo, se conoce muy poco acerca de su función como coregulador de la transcripción. En este trabajo encontramos que BRCA1 tiene un rol crucial en la respuesta al estrés genotóxico en células tumorales de próstata. Por ensayos de viabilidad celular (MTS) observamos que la sobre-expresión de BRCA1 aumentó significativamente la sensibilidad a la Doxorubicina en células PC3. Utilizando la técnica de citometría de flujo, determinamos que este aumento se asocia directamente con un incremento de la apoptosis y del porcentaje de células bloqueadas en S con concomitante arresto del ciclo celular en G2/M. Del mismo modo, la exposición a Doxorrubicina de líneas celulares PC3 transfectadas en forma estable que tienen silenciada la expresión de la proteína BRCA1, produjo una significativa disminución de la apoptosis y del bloqueo en fase S del ciclo celular. Recientemente encontramos varios blancos transcripcionales de BRCA1 que podrían ser la causa de esta respuesta al estrés genotóxico. En este trabajo, estudiamos específicamente un nuevo blanco de BRCA1: GADD153, una proteína de arresto del crecimiento y respuesta al daño en el ADN, asociada a la apoptosis inducida por estrés del retículo endoplasmático. A través de estudios in vivo de inmunoprecipitación de la cromatina (ChIP), encontramos que BRCA1 se asocia al promotor de GADD153 luego del tratamiento con agentes genotóxicos. La sobre-expresión de BRCA1 potenció la inducción por agentes genotóxicos de la actividad transcripcional de GADD153 así como también de los niveles de mensajero maduro. Asimismo, el silenciamiento de BRCA1 causó una marcada represión de la actividad del promotor de GADD153 y de sus niveles de mensajero. Asimismo, al silenciar la expresión de GADD153(RNAi) se anuló el aumento en la sensibilidad a esta droga luego de sobre-expresar BRCA1. Estos resultados muestran que GADD153 es fundamental para el rol de BRCA1 en la inducción de apoptosis y el arresto del ciclo celular luego del tratamiento con Doxorubicina en líneas tumorales de próstata. De esta manera, los tumores que poseen una disminución de la expresión de la proteína BRCA1 presentarán una marcada resistencia a la quimioterapia y todo esto debido a la función reguladora de la transcripción del supresor de tumores BRCA1.