Determinación simultánea de fluoroquinolonas, sulfametoxazol y diclofenac en medio acuoso empleando electroforesis capilar y nanopartículas de oro

VALERIA SPRINGER; MARCELO AVENA; MARÍA EUGENIA CENTURIÓN

Santa Rosa

Congreso; 10º Congreso Argentino de Química Analítica; 2019

AQA

El uso combinado de antibióticos y antiinflamatorios no esteroides es una estrategia ampliamente adoptada en prácticas veterinarias para el tratamiento de ciertas infecciones y los procesos inflamatorios asociados 1 . No obstante, debido a la masiva aplicación, estos fármacos y sus metabolitos pueden encontrarse en aguas superficiales y en alimentos de origen animal 2,3 . Por ese motivo, resulta necesario el desarrollo de métodos de análisis que permitan su determinación en forma sencilla y rápida. En este trabajo se propone un método electroforético basado en la técnica de llenado parcial, empleando nanopartículas de oro (AuNPs) como fase pseudoestacionaria, para la determinación simultánea de enrofloxacina (ENR), ciprofloxacina (CIP), sulfametoxazol (SMZ) y diclofenac sódico (DC) en medio acuoso. En un primer paso se procedió a la síntesis de AuNPs empleando una mezcla reductora de borohidruro: citrato (1:1) y dodecilsulfato de sodio como estabilizante, asistiendo con agitación magnética durante 10 min a 90ºC. Las AuNPs obtenidas resultaron esféricas, con un tamaño promedio de 15 nm y potencial zeta de -40 mV. Posteriormente, se estudiaron el voltaje aplicado, temperatura, pH del medio y tiempo de inyección para la separación electroforética de los analitos mediante la técnica de llenado parcial, empleando como electrolito una solución de borato de sodio 25 mM y detección UV (λ=270 nm, CIP y ENR; λ=200 nm, SMZ y DC). La inyección de las AuNPs en el sistema electroforético se realizó hidrodinámicamente, evaluando la presión aplicada (0,1 – 0,5 psi) durante 30 s, antes de la introducción de los analitos (pH=6). Se realizó una comparación de los resultados con aquellos obtenidos sin usar la técnica de llenado parcial con nanopartículas. En todos los casos, los tiempos de migración disminuyeron al incrementar la cantidad de AuNPs, sin afectar la resolución de los picos (Rs > 1,5), demostrando así la existencia de una interacción analito-nanopartícula. Finalmente, se procedió a separar los cuatro fármacos empleando las condiciones óptimas: borato de sodio 25 mM, pH=9,0; temperatura, 20ºC; voltaje de separación, 20 kV; inyección hidrodinámica de los analitos (0,5 psi - 20 s) e inyección de AuNPs aplicando 0,5 psi durante 30 s. Así, los analitos se separaron en el siguiente orden: CIP – ENR – DC – SMZ. El método propuesto se evaluó en un intervalo de concentraciones entre 0,50 – 5,0 µg mL -1 para CIP y ENR, con límites de detección menores 0,30 µg mL -1 (R 2 > 0,990) y entre 0,30 – 5,0 µg mL -1 para SMZ y DC, con límites de detección menores a 0,18 µg mL -1 (R 2 > 0,995). A partir de los resultados obtenidos se puede concluir que las AuNPs sintetizadas demostraron ser una herramienta útil para la separación de los fármacos seleccionados permitiendo disminuir el tiempo total de análisis (