INVESTIGADORES
NERLI Bibiana Beatriz
congresos y reuniones científicas
Título:
CARACTERIZACIÓN Y COMPARACIÓN DE LAS PROPIEDADES DE REPARTO DE DOS SISTEMAS BIFÁSICOS TERMO-SENSIBLES NO CONVENCIONALES
Autor/es:
REBAGLIATI, MARTÍN; TUBÍO GISELA; NERLI BIBIANA; PICÓ GUILLERMO
Lugar:
Tandil
Reunión:
Congreso; XV Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica.; 2007
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Investigación Fisicoquímica.
Resumen:
En los últimos años los sistemas bifásicos acuosos (SBAs) se han empleado exitosamente en el aislamiento de diversas biomoléculas por presentar ventajas comparativas respecto de otros métodos de purificación como su sencillez, bajo costo y fácil escalado. Debido a su bajo impacto medioambiental, aquellos SBAs formados por un polímero termo-reactivo y una sal son particularmente interesantes ya que permiten por calentamiento de la fase rica en polímero luego de un primer paso extractivo, recuperar la proteína de interés y reciclar el polímero. El objetivo de este trabajo es caracterizar y comparar las propiedades de reparto de dos nuevos SBAs formados por: i) copolímero al azar de óxidos de etileno y propileno (EO50PO50) /citrato de sodio (Cit) y ii) copolímero ordenado de óxidos de etileno y propileno (EO80PO20)/Cit. El Cit es una sal biodegradable. La caracterización de los SBAs se realizó obteniendo la curva binodial mediante titulación turbidimétrica. Las concentraciones de equilibrio de Cit y del polímero en ambas fases fueron determinadas por un método enzimático y por refractometría diferencial respectivamente. Se ensayó el comportamiento de reparto de dos proteasas con propiedades fisicoquímicas similares: tripsina (TRP) y quimotripsina (ChTRP). Los respectivos coeficientes de reparto (Kr) se obtuvieron midiendo la actividad de ambas enzimas frente a sustratos cromogénicos específicos. Se observó que la formación del sistema bifásico requería de menores concentraciones de EO50PO50 que de EO80PO20 debido al mayor carácter hidrofóbico del primero. El incremento del pH desde 5,2 a 8,2 produjo un desplazamiento de la curva binodial hacia el origen de coordenadas en ambos SBAs indicando el papel preponderante del anión Cit3-en el proceso de separación de fases. Un efecto similar produjo el incremento de temperatura. El Kr de TRP mostró ser superior al de ChTRP en la mayoría de los SBAs ensayados. El aumento de la longitud de la línea de unión produjo un marcado incremento de Kr de TRP mientras que Kr para ChTRP sólo se vio afectada levemente. Los SBAs EO50PO50 /Cit pH 6,2 mostraron la mayor capacidad separativa (KrTRP/KrChTRP = 4). Esta propiedad junto con su baja temperatura de separación de fases (50 °C) muestran a estos SBAs como muy convenientes para la separación de estas proteínas pancreáticas.