SISTEMAS MICELARES DE DOS FASES ACUOSAS FORMADOS POR TRITÓN X- 114 Y MEDIO DE CULTIVO DE PICHIA PASTORIS COMO METODOLOGIA INTEGRATIVA PARA EXTRAER ANTICUERPOS RECOMBINANTES

PELLEGRINI MALPIEDI, LUCIANA; ARIAS, CÉSAR; NERLI, BIBIANA; PESSOA JR, ADALBERTO

Natal

Congreso; 27° Congreso Brasileño de Microbiología; 2013

La extracción líquido-líquido en sistemas micelares de dos fases acuosas (SMDFAs) es una metodología que ya ha demostrado resultados satisfactorios en cuanto a la integración de procesos como clarificado, concentrado y enriquecimiento de diversas biomoléculas. En este marco, el objetivo de este trabajo fue desarrollar estrategias separativas sencillas y económicas para la extracción del fragmento de anticuerpo scFv anti LDL ox a partir de Pichia pastoris, empleando SMDFAs formados por el detergente no iónico Tritón-X114 y medio de cultivo de levadura. En primer lugar, fueron determinadas las correspondientes curvas de coexistencia para aquellos sistemas micelares formados por el detergente no iónico Tritón X-114 y diferentes proporciones de medio de cultivo de Pichia pastoris (30, 60 y 90 %mt). Se analizó además el efecto de diferentes variables como la presencia de sales (NaCl, MgSO4 y KI) y los ligandos Cibacron Blue F3GA (CB) y FabsorbentTM F1P (HF) sobre la temperature de separación de fases (Tsep).