Efecto del hongo endofítico Epichloë tembladerae en la micropropagación de Bromus setifolius.

NOVAS, M.V.; REGALADO GONZÁLEZ JJ; VICTORIA BERDION GABARAIN; IANNONE L.J.

Congreso; IV Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental; 2018

La División Agrícola y Ambiental (DiMAyA) y la Subcomisión de Microbiología General de la Asociación Argentina de Microbiología

Bromus pictus es una gramínea autóctona de la Patagonia, de interés por ser consumida por ovejas, no ser toxica y crecer en ambientes extremos. Algunas poblaciones están asociadas a diferentes especies de endofitos fúngicos de vástago del género Epichloë, que pueden promover la emergencia de semillas y el desarrollo vegetativo de la planta. Siendo gramínea, es considerada recalcitrante para su cultivo in vitro, sin embargo, estudios previos indican que los endofitos Epichloë mejoran la micropropagación de Lolium multiflorum y Bromus auleticus. El objetivo de este trabajo es estudiar el efecto de Epichloë tembladerae en las distintas fases de la micropropagación de B. pictus. Semillas de B. pictus asociadas (E+) o no (E-) a E. tembladerae fueron esterilizadas y sembradas en placas de Petri con medio MS suplementado con 30 g/l de sacarosa y con medio CIM (Callus Induction Medium), consistente en MS suplementado con 30 g/l de sacarosa, 2 mg/l de 2,4-D y 0.1 mg/l de Bencil-adenina (BA). Se sembraron e incubaron durante 4 semanas en oscuridad a 25±2ºC, 180 semillas E+ y 180 E- en 3 repeticiones de 60 cada una. En el medio MS se registró un porcentaje de germinación significativamente mayor para las semillas E+ (87±4%) que para las E- (43±6%). En el medio MIC se obtuvo un porcentaje de formación de callos significativamente mayor para las semillas E+ (84±3%) que para las semillas E- (46±4%). Los callos obtenidos fueron subcultivados en nuevas placas con medio MIC cada 4 semanas hasta alcanzar un diámetro de 0,5 cm, tras lo cual se sembraron en placas de medio RM (Regeneration Medium), consistente en MS suplementado con 30 g/l de sacarosa y 0.2 mg/l de Kinetina, e incubadas durante 8 semanas a 25±2ºC con un fotoperiodo de 16 h luz y 8 de oscuridad para inducir la regeneración de brotes de B. pictus. Sin embargo, esta regeneración no tuvo éxito. Estos resultados nos permiten concluir que E. tembladerae incrementa sustancialmente tanto la germinación como la formación de callo en las semillas de B. pictus, paso inicial del protocolo de micropropagación. Sin embargo serán necesarios ensayos adicionales de regeneración para completar este protocolo y estudiar el efecto de E. tembladerae en esta etapa. Una vez obtenido este protocolo, podrá ser usado para el desarrollo de nuevas herramientas biotecnológicas en B. pictus.