Efecto del co-cultivo de dos basidiomicetes en la secreción de enzimas involucradas en la remoción de Bifenilos Policlorados (PCBs)

LL VILLALABA; ML BARCHUK; LN LEVIN; AS TATARIN; PD ZAPATA; M. SADAÑOSKI

Mar del Plata

Congreso; IV Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental; 2018

Asociación Argentina de Microbiología

Los hongos de pudrición blanca poseen enzimas oxidativas e hidrolíticas que podrían estar implicadas, directa o indirectamente, en la remoción de PCBs. El objetivo del siguiente trabajo fue determinar el perfil proteico y la actividad enzimática lacasa (Lac), manganeso peroxidasa (MnP), endoglucanasa (EG) y xilanasa (Xy) en suelo tratado con bioestimulación y bioaumentación de co-cultivo de Pycnoporus sanguineus LBM 023 y Pleurotus sajor caju LBM 105. Para el tratamiento de bioaumentación se mezcló suelo no estéril (2 mm) al 60% de humedad con P. sanguineus LBM 023, P. sajor-caju LBM 105 o el co-cultivo inmovilizados en bagazo de caña de azúcar (3:1 p/p). La mezcla de suelo con sustrato lignocelulósico no inoculado fue utilizado para el tratamiento de bioestimulación (3:1 p/p). Los controles consistieron en suelo con y sin PCBs. Las mezclas se incubaron en condiciones no estériles, a 24 ºC por 60 días a humedad constante. Se extrajeron muestras destructivas los días 14, 42 y 60 de incubación de cada tratamiento por triplicado a las cuales se realizó la extracción de las enzimas con buffer fosfato de sodio pH 7. Del sobrenadante se determinaron las actividades enzimáticas Lac, MnP, Xy y EG, complementando con electroforesis desnaturalizante y no desnaturalizante. Como resultado, se pudo observar el incremento significativo (p < 0,05) de la actividad Lac y Xy en el co-cultivo al día 60 con respecto al suelo tratado con los monocultivos. La actividad MnP tuvo su pico máximo el día 14 para los tratamientos de bioaumentación con los monocultivos y al día 60 para el co-cultivo. La actividad EG fue significativamente mayor para el monocultivo de P. sanguineus LBM 023 al día 14. Tanto para el tratamiento de bioestimulación como para los controles, no se detectó ninguna de las enzimas estudiadas. Referido al perfil de secreción enzimática Lac, se puede observar la presencia de isoenzimas los días 14 y 42 para P. sanguineus LBM 023. P. sajor caju LBM 105 presentó dos isoenzimas el día 14 de cultivo. Para el caso del co-cultivo se observó la secreción de una enzima el día 14, 4 isoenzimas el día 42 y 2 isoenzimas al día 60. En la electroforesis no desnaturalizante se observó un perfil proteico marcado por mayor cantidad de bandas el día 60 para todos los tratamientos. Se concluye que el tratamiento de bioaumentación con co-cultivo presenta los valores más elevados de Lac, MnP y Xy. Tanto el perfil proteico y de secreción de Lac se vió modificado en el co-cultivo.