En busca de la transmisión horizontal en endofitos de asexuales Epichloë

MC CARGO, P.; NOVAS, M.V.; DE BATTISTA, P.J.; IANNONE, L.J.

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Micología; 2014

Bromus auleticus, una gramínea forrajera nativa de Sudamérica, es hospedante de 2 especies de hongos asexuales endofíticos mutualistas, Epichloë pampeana y E. tembladerae (también asociada a otras 20 especies de gramíneas), que hasta el momento no se han encontrado coexistiendo en una misma población. Las formas asexuales de este género fúngico han sido ampliamente estudiadas por su interés agronómico, caracterizándose por brindar al hospedante resistencia a la sequía y a la herbivoría por insectos o mamíferos, incremento de biomasa y por presentar exclusivamente transmisión vertical, es decir, propagarse de planta madre a hija a través de la semilla. En los últimos años varios investigadores han encontrado evidencias de que además pueden presentar transmisión horizontal, al observar conidios en el epifilo y demostrar in vitro que el micelio de una especie de endofito de pastos era capaz de infectar plántulas de la misma especie de la que fue aislado. Con el objetivo de determinar posibles mecanismos de transmisión horizontal se evaluaron 3 diferentes formas de reinoculación e inoculación cruzada de endofitos Epichloë spp. en B. auleticus, algunas de las técnicas ya probadas en otros sistemas. Se trabajó con 2 ecotipos de B. auleticus libre de endofitos (E-), uno originario de El Palmar (EP) y otro de La Pampa (LP), generados con anterioridad a partir de poblaciones que originalmente presentaban las asociaciones EP-E. tembladerae y LP-E. pampeana. Como inóculo se utilizaron 2 cepas de E. tembladerae (una aislada de B. auleticus y otra de Poa lanigera) y 1 de E. pampeana (aislada de B. auleticus). In vitro, se inoculó micelio en activo crecimiento a través de una herida en el meristema de plántulas E-. También se probó la capacidad infectiva del micelio de los endofitos durante el período que comprende la germinación de las semillas hasta obtener plántulas de 2cm crecidas en placas de Petri. Y por último, con excepción de la cepa de E. pampeana de baja producción de conidios, se estudió la capacidad infectiva de los conidios en las flores de plantas E- en el campo, inoculando cuando la panoja cerrada terminó de surgir y durante el período de antesis. Para las 2 primeras técnicas se chequeó la presencia de hifas características de endofitos a los dos meses mediante la observación de un macollo mientras que para la última técnica se chequearon 10 semillas de cada panoja inoculada con un microscopio óptico. Se obtuvieron plantas infectadas con el endofito (E+) al utilizar la técnica de inoculación mediante herida en el meristema, registrando todas plántulas y semillas E- para los ensayos de las otras dos metodologías. Las combinaciones B. auleticus-endofito que resultaron E+ fueron: un 22% de las plántulas de EP y un 10% de LP inoculadas con E. tembladerae aislado de B. auleticus, y un 33% de LP inoculadas con E. tembladerae aislado de P. lanigera. Estos resultados sugieren la posibilidad de transmisión horizontal de E. tembladerae, como se espera al encontrar dicha especie asociada a diversas gramíneas, sin embargo haría falta seguir probando otros posibles mecanismos de dispersión alternativos.