Efecto de Tofacitinib en la activación de linfocitos T en pacientes con artritis reumatoidea

ALAMINO, VANINA; FERRERO, PAOLA; GARCÍA ORO, AGUSTINA; ONETTI, LAURA; MONTES, CAROLINA L.; ONOFRIO, LUISINA; ACOSTA, CRISTINA; RETA ARBÓ, LUCAS; CADILE, ISAAC; GRUPPI, ADRIANA; ZACCA, ESTEFANIA R.; ÁLVAREZ FERREIRA, MARÍA; WERNER, MARÍA; MUSSANO, EDUARDO; ACOSTA RODRÍGUEZ, EVA V.

Congreso; 53° Congreso Argentino de Reumatología; 2020

INTRODUCCIÓN. La artritis reumatoidea (AR) es una enfermedad inflamatoria crónica autoinmunede etiología desconocida. La inflamación y el daño del tejido característicos están mediados porvarios tipos de células, incluidos los linfocitos (Li) T y B, macrófagos, fibroblastos y osteoclastos. Eltratamiento actual puede incluir fármacos biológicos como los inhibidores de TNF (anti-TNF) omoléculas pequeñas inhibidoras de Janus quinasas (Jak) que complementan la terapia estándarcon metotrexato (MTX) u otros DMARDs. Tofacitinib (Tofa) es un inhibidor selectivo de Jak-1 y Jak-3 involucradas en la señalización intracelular de múltiples citoquinas relacionadas con la patogeniade AR. Tofa se utiliza con muy buenos resultados en pacientes adultos con respuesta inadecuada ointolerante a uno o más DMARDs. Algunos pacientes tratados muestran mayor incidencia deinfección por herpes zoster.Los LiT tanto CD4 como CD8 son células inmunes involucradas en la patogenia de la AR cuyaactivación requiere señales a través de su receptor antigénico en concierto con señalescostimulatorias mediadas por las moléculas CD27 y CD28. En estas células activadas, el factor detranscripción T-bet es un regulador esencial de la diferenciación y función efectora. La disminucióny pérdida en la expresión de CD27 y CD28 identifican el estadío final de diferenciación de los LiT,caracterizado por una pobre respuesta efectora y susceptibilidad a la muerte celular.A pesar de los numerosos estudios sobre el efecto de Tofa en el sistema inmune, el conocimientosobre los efectos del mismo en la diferenciación y activación de los LiT en AR es escaso.OBJETIVOS. Estudiar el efecto de Tofa en la activación y diferenciación de los LiT in vivo enpacientes con AR y en experimentos in vitro con células de donantes sanos (CS).MATERIAL Y MÉTODOS. Para el estudio observacional en pacientes con AR, se reclutaron 31individuos controles sanos y 106 pacientes con AR según criterios de clasificación ACR/EULAR2010, 41 sin tratamiento (AR), 35 tratados con DMARDs, 22 con anti-TNF+/-DMARDs y 8 tratadoscon Tofa+/-DMARDs. Criterios de exclusión: infecciones en curso, otras enfermedadesautoinmunes, vacunación en los 2 meses previos, embarazo. Los individuos reclutados firmaron unconsentimiento informado y se les extrajo sangre por punción venosa. Se estudiaron 82 variablesbioquímicas e inmunológicas que incluyeron estudios fenotípicos de LiB y T mediante citometríade flujo en células de sangre entera y cuantificación de mediadores séricos por ELISA. Se realizó unanálisis multivariado a través de un análisis de componentes principales (ACP). También serealizaron ensayos in vitro para evaluar el efecto directo de Tofa en la activación de LiT CD4+ yCD8+ purificados a partir de células mononucleares de sangre periférica de CS. Las poblacionespuras fueron estimuladas con mitógenos (anti-CD3 y anti-CD28) en presencia de distintasconcentraciones de Tofa (1, 10 y 25 uM) durante 3 días, y luego se analizaron marcadores dediferenciación (CD27 y CD28, T-bet), activación (CD25) y proliferación (ki-67) mediante citometríade flujo.RESULTADOS. El ACP demostró que las 82 variables analizadas explican aproximadamente el 70%de la varianza. Las principales variables que diferencian a los grupos CS, AR, DMARDs, anti-TNF+/-DMARDs y Tofa+/-DMARDs están relacionadas con la activación y diferenciación de los Li. En estesentido, los pacientes tratados con Tofa presentaron un aumento significativo en el porcentaje deLiT CD4+ con características de diferenciación terminal (CD27-CD28-; p<0.01) y disminuciónsignificativa de la citoquina inflamatoria IL-22 (p<0.001). Por otro lado, resultados obtenidos delensayo in vitro demostraron que Tofa redujo la activación de los LiT CD4+ y CD8+, evidenciado porla disminución de expresión de CD25, T-bet y la frecuencia de células Ki-67+. Además, Tofaaumentó el porcentaje de células CD27-CD28- en LiT CD4+ y CD8+ e incrementó la muerte celularde acuerdo ensayos de viabilidad. Los efectos observados fueron dosis-dependientes.CONCLUSIONES. A través del estudio observacional en pacientes y los ensayos in vitro, concluimosque Tofa sería capaz de alterar la diferenciación y activación de los LiT. Hipotetizamos que éstepodría ser un mecanismo subyacente a los efectos biológicos de esta droga en AR.