Los niveles de la proteína transportadora de lípidos StarD7 modifican la dinámica mitocondrial

ROJAS ML; KOURDOVA LT; CRUZ DEL PUERTO MA; MIRANDA AL

Congreso; XXII Jornadas Científicas Sociedad de Biología de Córdoba; 2019

Las mitocondrias son organelas dinámicas cruciales para la función y sobrevida celular involucradas en la producción deenergía oxidativa. StarD7.I es una isoforma de la proteína transportadora de lípidos que tiene una señal de localizaciónmitocondrial y participa en el transporte de fosfatidilcolina (PC) a la mitocondria. Los lípidos mitocondriales afectanfunciones importantes tales como el metabolismo respiratorio, la arquitectura de la membrana, la importación de proteínas, lamitofagia y la dinámica mitocondrial. La dinámica mitocondrial es la resultante de eventos de fusión y fisión de mitocondrias,los cuales mantienen y aseguran las demandas metabólicas. Las proteínas mitofusinas 1 y 2 (Mfn1 y Mfn2) y optic atrophytype-1 (Opa1) están involucradas en el proceso de fusión, mientras que dynamin-related protein 1 (Drp1) y fission 1 (Fis1),entre otras, participan en la fisión. Estudios previos han demostrado que la disminución de StarD7 induce alteraciones en lamorfología mitocondrial y el retículo endoplásmico con una reducción del contenido mitocondrial de PC, sin embargo aún nose ha explorado cómo diferentes niveles de StarD7 afectan la dinámica mitocondrial. En este trabajo, se generaron líneasestables HTR8/SVneo que expresan StarD7.I, la forma citosólica StarD7.II y células estables controles, mediante transducciónlentiviral. Se demostró mediante microscopía confocal y tinción con mitotracker red que la sobre-expresión de StarD7.Ipromueve alteración de la morfología mitocondrial mientras que ningún cambio se observó en las mitocondrias de las célulasestables StarD7.II comparadas a las células controles. Ensayos realizados con la proteína fotoactivable que contiene una señalde localización mitocondrial (PA-GFP) indicaron que las células estables que sobre-expresan StarD7.I son capaces de realizarfusiones mitocondriales transitorias. Además se observó que las mitocondrias de las células StarD7.I estables poseen mayormovilidad, mantienen el potencial de membrana mitocondrial y producen menor generación de ROS que las células controles.Experimentos de western blot mostraron un incremento en la expresión de las proteínas Drp1 y Mfn2 en las células StarD7.I,mientras que los valores de Mfn1 disminuyeron. Por otro lado, el silenciamiento de StarD7 generó fragmentaciónmitocondrial, con un fenotipo particular tipo ?donuts? o anillo, sin movilidad mitocondrial asociada a una disminución deDrp1 y Mfn2 y aumento en las ROS. Estos resultados indican que alteraciones en los valores proteicos de StarD7.I generancambios significativos en las proteínas que controlan la morfología mitocondrial impactando en la dinámica mitocondrial