Estudio del rol de las células epiteliales mamarias bovinas en la inducción de la respuesta inmune innata contra staphylococcus aureus planctónico o biofilm

BOHL LP, BOSCO C, ISAAC P, BRESER ML, CONESA A, ORELLANO MS, CORREA SG, TOLOSA DE TALAMONI N, PORPORATTO C

La Plata

Congreso; XII Jornadas y Reunión Anual de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria (AAIV).; 2019

La mastitis bovina es la inflamación de la glándula mamaria, ocasionada principalmente por infecciones bacterianas. Esta patología presenta alta incidencia a nivel mundial y regenera pérdidas económicas importantes en el sector lácteo. La formación de biopelículas (o biofilm) se considera una ventaja selectiva para los patógenos y ha sido asociada con la evasión a la respuesta inmune del huésped y la resistencia a los antimicrobianos. Este modo de crecimiento de la bacteria ha cambiado la forma en que se estudian las interacciones entre los patógenos y las células huésped en el laboratorio. Por ello, el objetivo de este trabajo fue estudiar la respuesta inmune innata in vitro de células bovinas infectadas con Staphylococcus aureus en modos de vida libre (planctónico) y en biofilm. Se utilizó la cepa formadora de biofilm S. aureus V329 (aislada de mastitis subclínica), una mutante biofilm negativa (S. aureus V329 Δbap Δica) y las líneas celulares bovinas MAC-T (epiteliales de glándula mamaria) y BoMac (macrófagos). Se determinó la invasión bacteriana mediante el ensayo de exclusión con gentamicina, implementando tres metodologías experimentales que difieren en el modo de representar las biopelículas. Luego, se eligió una de las metodologías para el estudio de la expresión del receptor de reconocimiento tipo Toll (TLR) 2 (citometría de flujo), la producción de citoquinas IL1β e IL6 (ELISA) y la expresión génica de IL1β, IL6, IL8, TNFα y NFkB (retrotranscripción seguida de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real). El análisis estadístico de los datos se realizó con test t, ANOVA o Kruskal Wallis (*p