Bioacumulación de cianotoxinas en camarones (Palaemonetes argentinus)

GALANTI, LUCAS NICOLÁS; AMÉ, MARÍA VALERIA; WUNDERLIN, DANIEL ALBERTO

Santa Fe

Congreso; III Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental (SETAC); 2010

SETAC

Las Microcistinas (MCs) son heptapeptidos monociclicos hepatotoxicos producidos por cianobacterias, las cuales proliferan en cuerpos de agua eutrofizados. Se han descripto mas de 80 variantes de MCs que difieren principalmente en dos aminoacidos (en las posiciones 2 y 4) y en el grado y posicion de metilaciones. La toxicidad de MCs es mediada por una union fuerte con las serina/treonina protein-fosfatasas 1 y 2A a lo que se atribuye su capacidad para promover tumores cancerigenos a nivel hepatico. El objetivo de este trabajo fue evaluar el pasaje de MCs desde agua a camarones, como una medida de la bioacumulacion y posible biomagnificacion de MCs en la cadena trofica. Para poder cumplir con este objetivo fue necesario optimizar la extraccion de MCs desde camarones, para luego proceder a ensayos de bioacumulacion en  condiciones controladas de laboratorio. Durante la etapa pre-analitica se ensayaron distintos sistemas de solventes de extraccion, probandose recuperaciones de MCs desde muestras biologicas, usando nodularian como estandar interno. El mejor solvente para extraer MCs desde camarones fue una dilucion al 70% de metanol en agua con 0.1% de trifluoroacetico (TFA). La identificacion y cuantificacion de MCs se realizo por cromatografia liquida (HPLC-Prostar 210 Varian), utilizando una columna C18 y metanol:acido formico 0.3% como solvente de elucion. Las MCs fueron ionizadas utilizando una fuente ESI en modo positivo acoplada a un espectro de masas (1200L triple cuadrupolo-Varian). La identificacion y cuantificacion se realizo usando MCs puras (Sigma) como patrones. Las exposiciones de camarones a MCs se hicieron usando MCLR a 1 y 10 ìg L-1 durante 1, 2 y 7 dias, MCLR a 50 ìg L-1 durante 1 y 4 dias y MCYR a 10 ìg L-1 durante 1, 2 y 7 dias. Los ensayos a bajas concentraciones (YR y LR), mostraron desaparicion de MCs del agua, sin indicios notables de bioacumulacion, posiblemente por efecto de degradacion biologica de MCs. Por ello los ensayos con MCLR a 50 ìg L-1 se realizaron en pseudo esterilidad observandose una bioacumulacion de 0,13 ìg MCLR g-1 de camaron (peso humedo), lo que equivale a una captacion de aproximadamente 30% de la cantidad de MC-LR que desaparece del agua. Estos resultados preliminares demuestran que MC-LR se acumula en P. argentinus y sugieren la necesitada de verificar la degradacion biotica o abiotica de MCs para poder realizar ensayos de bioacumulacion y establecer el balance entre MCs disponibles y MCs acumuladas en la cadena trofica. -1 durante 1, 2 y 7 dias, MCLR a 50 ìg L-1 durante 1 y 4 dias y MCYR a 10 ìg L-1 durante 1, 2 y 7 dias. Los ensayos a bajas concentraciones (YR y LR), mostraron desaparicion de MCs del agua, sin indicios notables de bioacumulacion, posiblemente por efecto de degradacion biologica de MCs. Por ello los ensayos con MCLR a 50 ìg L-1 se realizaron en pseudo esterilidad observandose una bioacumulacion de 0,13 ìg MCLR g-1 de camaron (peso humedo), lo que equivale a una captacion de aproximadamente 30% de la cantidad de MC-LR que desaparece del agua. Estos resultados preliminares demuestran que MC-LR se acumula en P. argentinus y sugieren la necesitada de verificar la degradacion biotica o abiotica de MCs para poder realizar ensayos de bioacumulacion y establecer el balance entre MCs disponibles y MCs acumuladas en la cadena trofica.